活动期Vogt-小柳原田综合征患者体内MDMs细胞线粒体受损及ROS产生水平与静止期Vogt-小柳原田综合征患者、AAU患者和正常

活动期Vogt-小柳原田综合征患者体内MDMs细胞线粒体受损及ROS产生水平与静止期Vogt-小柳原田综合征患者、AAU患者和正常人相比明显升高;poly I:C和LPS可以使各组MDMs细胞线粒体受损及ROS产生水平明显增高,并且活动期Vogt-小柳原田综合征患者升高水平明显高于其它组;anti-TLR3/anti-TLR4可以明显降低poly I:C/LPS对MDMs细胞线粒体损伤和ROS产生的作用;rotenone可以明显升高MDMs细胞ROS产生水平及IL-1β产生水平,而DPI可以明显降低MDMs细胞ROS产生水平及IL-1β产生水平。 4.基因沉默炎症小体NLRP3后,各组IL-1β产生水平显著降低。 5. ROS通过激活p38和ERK1/2信号通路进而激活炎症小体NLRP3,从使IL-1β产生增多。

结论: 我们的结果显示:TLR3/4在活动期Vogt-小柳原田综合征患者MDMs细胞中表达明显升高。TLR3/4与其配体poly I:C/LPS相互作用可以通过使线粒体产生ROS增多,激活炎症小体NLRP3,进而使IL-1β产生增多引起炎症反应。
紫锥菊(Echinacea purpurea)是近年来备受关注的一种安全、高效多功能药用植物,其具有强大的免疫调节活性。巨噬细胞和树突状细胞(dendritic cell, DC)同为机体免疫系统的重要成员,前者具有吞噬、分泌、组织修复、抗原递呈等多种功能,后者为专职抗原提呈细胞并能分泌多种细胞因子,两者均在非特异性免疫(先天性免疫)和特异性免疫(获得性免疫)中有重要作用。Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)主要表达于巨噬细胞和DC,该类受体在识别配体后,既能够通过激活炎症因子和I型IFN分泌,启动非特异性免疫反应,又可以通过促进DC成熟并递呈抗原,启动特异性免疫反应。因此,本研究拟先以小鼠为研究材料,探讨紫锥菊提取物(Echinacea purpurea extract, EE)对其机体免疫功能和抗沙门氏菌感染能力的影响,再以小鼠巨噬细胞和DC为研究对象,研究EE对两者免疫功能的影响以及TLR信号通路在此免疫调节活动中的作用,最终结合两方面的研究结果,阐明EE调控小鼠细胞和机体免疫功能以及抗沙门氏菌感染能力的机理。主要研究内容及结果如下:

(一)EE对小鼠机体免疫功能和抗沙门氏菌感染能力的影响 50只体重相近的C57BL/6雌性小鼠被随机分为5组,对照组、EE组、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium, ST)组、EE+ST组和庆大霉素(gentamycin, GM)+ST组,每组10只。对照组、EE组分别以PBS和EE 这个 (10mg)连续灌胃17天,研究EE对正常小鼠机体免疫功能的影响;ST组、EE+ST组和GM+ST组分别以PBS、EE (10mg)和PBS连续灌胃17天,并于第15天再灌胃5×10~8CFU ST感染小鼠,研究EE对小鼠机体抗沙门氏菌感染能力的影响。结果如下:

EE对正常小鼠机体免疫功能的影响:(1)EE对正常小鼠生长和肠粘膜结构无显著影响,说明其对小鼠机体具有良好的安全性;(2)EE可显著提高小鼠机体免疫功能,提高其脾脏指数;(3)EE可在一定程度上可增强小鼠机体的抗体分泌功能,增加小肠分泌型IgA (secretory IgA, sIgA)分泌,但对IgG分泌没有影响;(4)EE可增强小鼠机体的非特异性免疫功能,显著上调小鼠血液、回肠、结肠、脾脏、肠系膜淋巴结(mesenteric lymph node, MLN)和肝脏中促炎细胞因子白介素(interleukin, IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor, TNF)-α、干扰素(interferon, IFN)-γ和抑炎细胞因子IL-10的表达并显著增加其回肠和结肠的NO产生。 Proteasomal 抑制剂s EE对小鼠机体抗沙门氏菌感染能力的影响:(1)EE可缓解ST感染对小鼠机体和免疫系统的损伤,消除鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium, ST)感染引起的小鼠体重下降,大幅减轻ST感染引起的肠粘膜损伤以及脾脏肿大和CD4+/CD8+值下降;(2)EE可降低肠粘膜的ST感染程度,显著减少回肠和结肠粘膜的中性粒细胞浸润以及ST在结肠的定植和ST向肝脏和脾脏中的移位;(3)EE可增强ST感染小鼠机体的抗体分泌功能,显著促进IgG和sIgA分泌;(4)EE可增强ST感染小鼠机体的非特异性免疫功能,显著上调血液、脾脏、MLN和肝脏中促炎细胞因子IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-y和抑炎细胞因子1L-10的表达并显著增加其回肠和结肠的NO产生。 以上结果提示,EE能够通过增强小鼠的机体免疫功能,提高其抗感染能力。 (二)EE对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响 本研究分别以200μg/mL和100μg/mL EE处理RAW264.7小鼠巨噬细胞系和骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage, BMDM),研究EE对两者免疫功能的影响。结果如下: EE对RAW264.7小鼠巨噬细胞系免疫功能的影响:(1)EE对RAW264.7细胞的安全浓度为0-200μg/mL;(2) EE可激活RAW264.7细胞,显著提高酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)和乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)活性;(3)EE可增强RAW264.7细胞的吞噬功能;(4)EE可增加RAW264.7细胞的细胞因子分泌,显著上调促炎因子IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ抗炎因子IL-10、转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β1和抗病毒细胞因子IFN-p的基因表达和分泌;(5)EE可增强RAW264.

Snapshot data were compared to Sanger sequencing data Of the 110

Snapshot data were compared to Sanger sequencing data. Of the 110 samples, 51(46.4%) harbored at least one mutation. The mutation frequency in adenocarcinoma specimens was 55.6%, and the frequencies of EGFR, KRAS, PIK3 CA, PTEN, and MEK1 mutations were 35.5%, 9.1%, 3.6%,

0.9%, and 0.9%, respectively. No mutation was found in the HER2, NRAS, or BRAF genes. Three of the 51 mutant samples harbored double mutations: two PIK3 CA mutations coexisted with KRAS or EGFR mutations, and another KRAS mutation coexisted with a PTEN mutation. Among the 110 samples, 47 were surgical specimens, 60 were biopsy specimens, and 3 were cytological specimens; the corresponding mutation frequencies were 51.1%, 41.7%, and 66.7%, respectively(P = 0.532). Compared to Sanger sequencing, Snapshot specificity

was 98.4% and sensitivity was 100%(positive predictive selleck value, 97.9%; negative predictive value, 100%). The Snapshot assay is a sensitive and easily customized assay for multigene mutation testing in clinical practice.
肺癌是病死率最高的恶性肿瘤,许多肺癌患者发现时已是晚期,丧失了手术机会,以化疗为主的内科治疗在肺癌的治疗中扮演着重要角色。近年来,以表皮生长因子受体等为靶点的靶向药物研制取得重大进展,有些药物已经应用于临床并取得了满意的效果。许多潜在靶点和药物也在世界范围内研究和开发中。现综述肺癌靶向治疗的研究进展。
目的:回顾性分析肺炎性肌纤维母细胞瘤的临床病理特点、诊治现状及预后。方法:选取2009-01-01-2012-12-31河北医科大学第四医院7例因患肺炎性肌纤维母细胞瘤而入院治疗患者,对其临床症状、影像学表现、病理特征及随访资料进行分析。结果:共7例肺炎性肌纤维母细胞瘤患者,占同期胸外科手术的0.078%(7/8 NSC683864订单 968)。男3例,女4例。年龄23~71岁,平均年龄48.1岁。有呼吸道症状者3例,其余患者均为体检发现,病变位于左上叶者4例,左下叶者2例,右下叶者1例。病灶呈周围型3例,中心型3例,浸润生长1例;术前诊断考虑为癌或癌可能性大的5例,考虑为良性病变者1例,术前明确诊断为肺炎性肌纤维母细胞瘤者1例;本组7例均行手术治疗,其中肺楔形切除2例,肺段切除1例,肺叶切除4例,术后病理诊断均未发现肺门淋巴结转移。所有7例均在定期随访中,1例术后9个月发现纵膈、对侧肺及心包的转移,于术后17个月死亡,其余患者未发现复发或转移。结论:肺炎性肌纤维母细胞瘤是肺部少见的肿瘤,具有一定的异质性,术前明确诊断困难,手术完全切除是首选治疗,多数患者预后良好。
肺癌是中国发病率及死亡率最高的恶性肿瘤。肿瘤细胞在驱动基因的作用下持续生长,并对该驱动基因的抑制剂具有高敏感性。近年来,针对驱动基因的检测技术不断发展,相应的驱动基因靶向药物也层出不穷。本文主要从中国肺癌的驱动基因、驱动基因的检测及针对驱动基因的靶向治疗3个方面进行综述,并展望中国肺癌驱动基因的应用前景。
对非小细胞肺癌分子病理学的深入理解,有助于开展个性化临床治疗和预后。基因检测可以指导非小细胞肺癌靶向药物治疗,提升药物疗效,延长患者生存期。本文简要介绍了与非小细胞肺癌相关的EGFR基因和EML4-ALK融合基因检测方法的研究进展。
蛋白酪氨酸激酶是一类具有酪氨酸激酶活性的蛋白质,其异常表达与肿瘤的侵袭、转移以及肿瘤新生血管的生成等密切相关。以蛋白酪氨酸激酶作为靶点的药物研究已取得了突破性进展,目前已有二十余个小分子蛋白酪氨酸激酶抑制剂用于临床肿瘤的治疗,并有大量的抑制剂处于临床前和临床研究阶段。对近年来小分子蛋白酪氨酸激酶抑制剂的研究进展进行了综述。
医学科技日新月异,20世纪70年代随着单克隆抗体技术的发展,在病理学上开展了免疫组织化学(IHC),其把人们从传统病理组织学(形态学)推向蛋白质水平(抗原、抗体的定性和定位),在现代病理诊断中的应用日益广泛,尤其在肿瘤诊断与鉴别中起着非常重要的作用,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,扩展了对各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。近来肿瘤的分子病理诊断及靶向治疗的意义成为研究热点。
Gastric

通常 cancer represents a serious health problem on a global scale. It is the second leading cause of cancer-related death worldwide. Novel therapeutic targets are desperately needed because the meager improvement in the cure rate of about 10% realized by adjunctive treatments to surgery is unacceptable as > 50% patients with localized gastric cancer succumb to their disease.

Over the last 10 years,Chinese neuroscientists

have made

Over the last 10 years,Chinese neuroscientists

have made notable contributions to the study of the cellular and molecular mechanisms of synaptic plasticity,as AEB071体内 well as of the plasticity beyond synapses,including activity-dependent changes in intrinsic neuronal excitability,dendritic integration functions,neuron-glia signaling,and neural network activity.This work highlight some of these significant findings.
目的:探讨葡萄糖原合成酶-3β(glycogen synthase kinase3β,GSK-3β)的抑制剂TDZD-8对新生大鼠背根节(dorsal root ganglion,DRG)神经元轴突生长和延长的影响。方法:取新生(0.05);轴突远端Tubulin βⅢ表达比A、B、C、D组及0.5~3μM TDZD-8处理组明显增强,有统计学意义(P<0.01)。结论:完全瘫痪脊髓提取液明显抑制DRG神经元轴突生长,轴突回缩。低浓度TDZD-8能促进轴突生长,形成多个轴突或轴突分支,而高浓度TDZD-8明显抑制轴突生长,导致轴突回缩。

利用Wnt信号转导通路治疗脊髓损伤是当今前沿研究课题。Wnt信号通路中Wnt-3a、Wnt-5a等通过调控神经干细胞增殖与分化,促进神经元生成,为脊髓损伤治疗提供了新路径。该文就Wnt信号通路的来源、组成和转导,对神经干细胞的调控和对修复脊髓损伤的影响作一综述。
本文介绍了精神分裂症的主要研究方面的2009年部分进展。
目的探讨Wnt/β-catenin信号通路对树突状细胞(DC)免疫学功能的调控作用。方法用RT-PCR、免疫荧光的方法鉴定Wnt通路成员在DC中的表达情况;加入活化剂SB216763激活β-catenin信号,检测其对DC表型、细胞因子及趋化因子受体表达的影响。结果

DC表达有WNT5A配体及Wnt通路多种受体Frz1、Frz2、Frz3、LRP6以及ROR2的mRNA,免疫荧光试验也证实WNT5A分布在DC的整个胞浆。SB216763能使DC胞内的β-catenin积累,并能促进DC共刺激分子CD80、CD86和CD40表达上调,但是炎性因子和趋化因子受体的mRNA并无变化甚至变低。结论 Wnt信号通路成员广泛存在于DC内,β-catenin信号活化能引起DC表型成熟,但功能上属于1种耐受型的DC。
扭曲(twist)基因属于碱性螺旋-环-螺旋蛋白家族中高度保守的转录因子,在胚胎的发生发展中发挥着重要的作用。下文就扭曲基因的结构特征、与之表达相关的调控机制及其在牙髓干细胞中所起的作用作一综述。
目的观察胰岛素治疗2型糖尿病(T2DM)大鼠后心肌细胞线粒体凋亡的变化,探讨胰岛素通过线粒体发挥抗凋亡作用的机制。方法雄性Wistar大鼠采用链脲佐菌素(STZ)+高脂饮食诱发2型糖尿病。22只大鼠随机分为早干预组(IE组,n=7)、晚干预组(IL组,n=7)和糖尿病组(DM组,n=8),另选8只在鼠作为正常对照组。IE组和IL组分别于成模第1、4周给予诺和灵30R皮下注射,而DM组和正常对照组予以等量生理盐水皮下注射。8周后比较各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、心肌细胞凋亡指数的差异,并观察各组心肌细胞超微结构变化、线粒体膜电位及活性氧改变。结果与正常对照组相比,DM组大鼠血糖、心重(HW)/体重(BW)比值升高(P<0.05),SOD、GSH、膜电位均明显降低(P<0.01),而MDA、TUNEL凋亡指数则明显升高(P<0.01),活性氧产生速率增快。电镜下DM组大鼠线粒体嵴断裂,溶解、空泡化。与DM组比较,IE组上述指标均有改善(P<0.05),但IL组上述指标的改善不明显。结论胰岛素干预对糖尿病大鼠心肌细胞有抗凋亡作用,且早期干预优于晚期干预。
糖原合成酶激酶-3β(glycogen 没有 寻找更多 synthase kinase-3β,GSK-3β)可通过调节糖原合成酶、p27Kip1和c-Myc等蛋白因子,以及参与胞内经典的NF-κB信号通路等方式,调控癌细胞的分化、增殖与凋亡,通过参与单胺神经受体的行为调控作用在神经精神类疾病的发病机制中起到重要作用,同时还能通过Wnt通路以外的其他因子和通路介导神经退行性疾病的发生,因此,GSK-3β成为各种重大疾病治疗中炙手可热的抑制靶点。国内科研工作者借我国在传统中药的优势在开发GSK-3β天然药物抑制剂的研究方面做了很多工作,并取得不错的成果,而开发各种GSK-3β靶点抑制剂,以此调控多种蛋白因子或信号通路已成为治疗各种重大疾病的一种新的思路。
210189

The expression of transforming growth factor-β1 in the healing of rat’s delayed union with diabetes/Zhao Xiwu(赵锡武,Dept Orhtop,2nd Hosp Shandong Univ,Jinan 250033)…Chin J Exp Surg.-2010,27(4).-520~522
核转录因子-κB(NF-κB)是维持急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞生存的关键因子.近年来发现,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)可以正性调控NF-κB的活性.本研究通过抑制GSK-3β活性初步探讨ALL细胞中GSK-3β在NF-κB诱导细胞凋亡中的作用机制.收集ALL患儿骨髓单个核细胞,采用免疫荧光细胞化学方法检测到ALL细胞核内GSK-3β有明显聚集.体外培养ALL细胞后经GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)和SB216763处理,采用Western印迹和EMSA检测发现,ALL细胞核内GSK-3β表达下降,而NF-κBP65蛋白无明显变化,但是其活性明显降低.

2%的细胞被阻滞在G0/G1期,而在未处理的细胞中,仅有52 9%的细胞处于G0/G1期。RT-PCR及蛋白质免疫印迹显示在予TN

2%的细胞被阻滞在G0/G1期,而在未处理的细胞中,仅有52.9%的细胞处于G0/G1期。RT-PCR及蛋白质免疫印迹显示在予TNF-α处理后,施万细胞内SSeCKS的α亚型的mRNA水平、蛋白水平及磷酸化水平较正常细胞以剂量依赖的方式增加。在予TNF-α处理SSeCKS的α亚型干扰的施万细胞,细胞增殖分析及流式细胞分析术发现降低SSeCKS的α亚型的表达可以逆转TNF-α诱导的施万细胞的增殖抑制及G0/G1期的阻滞。进一步分析其原因,发现cyclin selleck化学 D1的表达及ERK1/2的激活水平随着TNF-α的浓度增加而降低,干扰SSeCKS的α亚型表达可以逆转TNF-α诱导的cyclin D1的表达水平及ERK1/2的激活水平的降低。同时,TNF-α可以诱导施万细胞中cyclin D1的细胞核定位减少及cyclin

D1与SSeCKS结合能力的增加,干扰SSeCKS的α亚型的表达可以逆转cyclin D1细胞核定位的减少。 3、用cAMP诱导施万细胞体外分化中,SSeCKS的表达随着诱导的时间的延长而降低。用EGFP标记的SSeCKS siRNA的慢病毒载体干扰施万细胞中SSeCKS的表达可以加快体外诱导的细胞分化的形态改变,同时在SSeCKS表达干扰的施万细胞中,分化的标记髓鞘蛋白0(myelin protein zero,P0)及髓磷脂相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)的表达较未干扰组增加。将干扰SSeCKS表达的施万细胞与神经元共培养诱导髓鞘的形成,发现干扰了施万细胞中SSeCKS的表达可以促进体外形成髓鞘的数量。进一步分析其机制,发现干扰SSeCKS的表达可以促进Akt 473号位丝氨酸的磷酸化。 结论 1、施万细胞中存在着TNF-α的自分泌循环,其分泌的TNF-α可以作用于自身,诱导自身的JNK和p38信号转导通路的激活,促进TNF-α的合成和分泌;TNF-α作用于施万细胞后,表达增多的SSeCKS可以通过促进JNK和p38的激活,在TNF-α的自分泌循环中发挥着正向调控作用。

2、TNF-α以剂量依赖的方式抑制施万细胞的增殖,诱导施万细胞中SSeCKS的mRNA水平、蛋白水平及磷酸化水平的上调,同时可以抑制cyclin D1的表达及细胞核定位。SSeCKS在TNF-α诱导的施万细胞增殖抑制中发挥着负性调控作用。这主要是通过抑制ERK1/2激酶的活性,下调cyclin D1的表达及增加与cycling D1结合,抑制cyclin D1的细胞核转位发挥作用。 3、SSeCKS在施万细胞的分化过程中表达下调,其可以抑制施万细胞的体外分化及髓鞘的形成;SSeCKS在施万细胞体外分化及髓鞘形成中的负性调控作用主要是通过抑制Akt的活化发挥作用。
[研究背景及目的] 在损伤、感染性疾病、神经退行性病变以及其他多种类型的神经系统疾病中,炎症反应是共同的特征。这些疾病的病程中都包含有炎症细胞的活化及炎症介质的合成与释放。这些炎性介质可以通过诱导细胞免疫,促进吞噬作用,对神经元起保护作用;但是,炎性介质的过多堆积改变了机体的内环境,不利于细胞正常状态下生物学功能的发挥,并导致神经元的凋亡和胶质细胞的损伤,这是促使神经纤维发生脱髓鞘病变的重要推动因素之一。 细胞间粘附分子-1(intercellular small molecule library screening adhesion molecule-1,ICAM-1)是一类大小为76kD-114kD的细胞表面跨膜糖蛋白,是免疫球蛋白超家族中的一员,由位于胞外的5个Ig样区域、一段跨膜区域以及一段胞质尾区组成。在细胞表面,ICAM-1是膜结合整合素受体淋巴细胞功能相关抗原-1(Lymphocyte Function-Associated Antigen,LFA-1)和单核细胞粘附分子-1(monocyte adhesion molecules-1,Mac-1)的配体。ICAM-1糖基化可以迅速影响其与Mac-1的结合,但是对其与LFA-1的结合影响较少。在多种炎症因子诱导的炎症中,ICAM-1表达上调并促进淋巴细胞的募集。 周围神经损伤后,大量炎症因子分泌,单核巨噬细胞向损伤局部聚集。在周围神经损伤后的Wallerian变性过程中ICAM-1其与配体Mac-1和LFA-1参与细胞的募集。在中枢神经系统(central

Selleck Bardoxolone nervous system, CNS)炎症性疾病的早期,ICAM-1是一种重要的粘附分子,介导了白细胞与内皮细胞粘附后穿过血脑屏障进入脑组织的过程。在脑内,淋巴细胞向炎症部位的迁移需要ICAM-1。这些现象表明在CNS炎症性病理过程中ICAM-1扮演着非常重要的角色。在本文研究中,我们拟在前人的研究基础上,分别从周围神经损伤所致的周围神经炎症,LPS(lipopolysaccharide)腹腔注射所致的全身炎症及LPS脊髓内注射所致的局部炎症等多角度分别研究ICAM-1在神经系统炎症中的作用,从而为阐明ICAM-1在神经系统免疫调节中的作用提供理论基础,为神经系统炎症性疾病的治疗提供依据。 [方法] 1.建立大鼠坐骨神经夹伤和切断的周围神经损伤模型,LPS腹腔注射的全身炎症模型及LPS脊髓内注射的脊髓局部炎症模型。 2.运用RT-PCR、Western Blot的方法检测坐骨神经,背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)及脊髓组织中ICAM-1表达的时空变化,运用免疫荧光双标,观察ICAM-1在这些组织中的细胞定位;分析施万细胞及小胶质细胞活化与ICAM-1表达水平之间的相关性。 3.分离培养并纯化大鼠施万细胞。在细胞水平,运用RT-PCR、Western Blot、免疫荧光及酶联免疫吸附等技术,检测LPS对ICAM-1表达、亚细胞定位的影响;并通过运用丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路抑制剂分析炎症刺激诱导ICAM-1表达的信号通路。 [结果] 1. 1)坐骨神经切断和夹伤后,ICAM-1在坐骨神经及相应背根神经节中表达均出现上调,后逐渐恢复正常。 2)正常状态下,ICAM-1在坐骨神经及DRG中表达较少,主要定位于血管内皮细胞。坐骨神经夹伤及切断后,ICAM-1主要定位于坐骨神经中的施万细胞和相应DRG中的神经元,与卫星细胞较少共定位。 2.

59万。肺癌最主要的病理类型包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中非小细胞肺癌占肺癌总数的80%~85%。非小细胞肺癌的主要

59万。肺癌最主要的病理类型包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中非小细胞肺癌占肺癌总数的80%~85%。非小细胞肺癌的主要
Since the discovery that non-small cell lung cancer(NSCLC) is driven by epidermal growth factor receptor(EGFR) mutations, the EGFR tyrosine kinase inhibitors(EGFR-TKIs, e.g., ge fi tinib and elrotinib) have been effectively used for clinical treatment. However, patients eventually develop drug resistance. Resistance to EGFR-TKIs is inevitable due to various mechanisms, such as the secondary mutation(T790M), activation of alternative pathways(c-Met,

HGF, AXL), aberrance of the downstream pathways(K-RAS mutations, loss of PTEN), impairment of the EGFR-TKIs-mediated apoptosis pathway(BCL2-like 11/BIM deletion polymorphism), histologic transformation, ATP binding 确认细节 cassette(ABC) transporter effusion, etc. Here we review and summarize the known resistant 以及 mechanisms to EGFR-TKIs and provide potential targets for development of new therapeutic strategies.
表皮生长因子受体家族,又称HER/ERBB家族,由四个成员组成:HER1/EGFR/ERBB1、HER2/NEU/ERBB2、HER3/ERBB3和HER4/ERBB4,在肿瘤的发生发展中具有重要作用。以EGFR家族为靶点的治疗已经成为当前的研究热点,尤以HER1、HER2的研究最为深入,相应的靶向治疗药物已应用于临床。但随着时间的推移,EGFR抑制剂耐药现象逐渐出现。目前研究发现,针对HER3的靶向治疗策略可能逆转这种耐药现象。全文综述HER3在肿瘤发生发展中的角色,EGFR抑制剂耐药机制以及HER3抗体逆转EGFR抑制剂耐药的研究进展,以期为优化EGFR家族靶向治疗提供新的思路。
1病历报告患者,女,51岁。因发现左乳腺肿物5个月于2012年8月20日入院,入院后查乳腺彩超示:左乳实性团块7.5cm×7.0cm×5.5cm,左腋下多发低回声结节,最大2.0cm×1.0cm(图1A)。于2012年8月21日行左乳腺肿物及左腋下淋巴结穿刺术,穿刺病理:(左侧)乳腺侵润性导管癌,Ⅱ级,未见脉管内
癌症对人类健康造成严重威胁。肿瘤的发生发展与多种因素密切相关,除了年龄、种族及地理等因素外,临床研究中还发现乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肝癌、前列腺癌及结肠癌等多种肿瘤在男性与女性中的发生率存在显著性差异,认为性激素可能会影响激素靶向性癌症的发生与发展,其中雌激素及其信号通路近年来成为广受关注的热点。雌激素受体(Estrogen

receptor,ER)包括ERα和ERβ,于1977年首次在子宫内膜细胞中被发现。
磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3 许多 kinase,PI3K)是细胞内重要的信号分子,它具有调节细胞增殖、分化、代谢、凋亡等功能。PI3K的基因易发生突变和扩增,从而导致PI3K被激活,与肿瘤的形成和发展密切相关。IA型的PI3K及其下游的信号分子组成的通路参与调节肿瘤细胞的增殖、存活、黏附、迁移等活动。综述了IA型PI3K——PI3Kα、PI3Kβ和PI3Kδ与肿瘤发生、发展的关系,列举了20个具有代表性的IA型PI3K抑制剂,并讨论了它们的分子抑制机制。
目的:体外观察白桦脂酸对天然表达缝隙连接蛋白32(Cx32)的BRL-3A细胞的细胞缝隙连接(GJ)功能及Cx32蛋白表达水平的影响.方法:SRB法检测不同质量浓度白桦脂酸对BRL-3A细胞的毒性;细胞接种荧光示踪法观察不同质量浓度白桦脂酸对GJ功能的影响;Western blot方法检测白桦脂酸影响GJ功能的质量浓度对Cx32蛋白表达水平的影响.结果:白桦脂酸在0~1μg/m L质量浓度对BRL-3A细胞无毒性作用;白桦脂酸(0.01~1μg/m L)质量浓度依赖性地降低GJ功能,但对Cx32表达无影响.结论:白桦脂酸在0.01~1μg/m L质量浓度范围内,降低BRL-3A细胞的GJ功能;这种作用与Cx32蛋白的表达水平无关.
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)蛋白家族介导的PI3K-Akt-mTOR信号传导通路涉及人体众多细胞功能的调节,是近年来抗肿瘤药物研究的重要靶标。Ⅰ型PI3K具有PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ和PI3Kγ4种关键亚型,这4种亚型各自介导不同的生命活动,因此设计亚型选择性抗肿瘤药物能够增加治疗的选择性,减少毒副作用。本文对于近期PI3K关键亚型抑制剂,特别是PI3Kα和PI3Kδ抑制剂,以及它们在PI3K-Akt-mTOR信号传导通路中的作用进行综述。
2015年1月20日奥巴马首次提出”精准医疗计划”,致力于治愈癌症和糖尿病等疾病,意味着精准医学时代的来临。所谓”精准医学”是随着基因组测序技术快速进步以及生物信息与大数据科学的交叉应用而发展起来的新型医疗模式。其本质是通过基因组、蛋白质组等组学技术和医学前沿技术,对于大样本人群与特定疾病类型进行生物标记物的分析与鉴定、验证与应用,从而精确找到疾病的原因和治疗的靶点,并对一种疾病不同状态和过程进行精
Acute myeloid leukemia(AML) is characterized by the accumulation of circulating immature blasts that exhibit uncontrolled growth, lack the ability to undergo normal differentiation, and have decreased sensitivity to apoptosis.

527+0 269 vs 1 943+0 1) mm, (P<0 01)。相对于模型组,各丹参酮和缬沙坦治疗组p-ERK减少,差异

527+0.269 vs.1.943+0.1) mm, (P<0.01)。相对于模型组,各丹参酮和缬沙坦治疗组p-ERK减少,差异均具有统计学意义(均P<0.05);另外,丹参酮高剂量和中剂量组,以及缬沙坦治疗组p-p38增加,差异均具有统计学意义(均P
吗啡耐受是临床控制疼痛的一大障碍,其机制的研究已有很长历史。近年来的研究表明,脊髓小胶质细胞在吗啡耐受过程中具有重要作用。但是关于小胶质细胞参与吗啡耐受的作用机制尚未阐明。P2X7受体(P2X7R),作为ATP受体P2X家族的一种亚型,属于ATP门控的离子通道受体。它在身体各个组织中有比较广泛的分布,主要表达在免疫系统。在中枢神经系统中,小胶质细胞作为免疫源性细胞,也表达大量的P2X7R。P2X7R的功能不仅涉及多种促炎因子(proinflammatory

cytokines)的合成和释放,还对谷氨酸(glutamate)的释放和再摄取具有调控作用。最近有研究显示,神经病理性疼痛引起脊髓P2X7R表达明显上调,而干扰P2X7R的功能可以减轻疼痛。鉴于吗啡镇痛耐受与神经病理性疼痛形成机制上的相似性,提示脊髓P2X7R可能参与吗啡镇痛耐受的形成。 Docetaxel 本实验采用行为学、细胞培养、Western blot、免疫荧光以及分子生物学技术,在吗啡镇痛耐受的大鼠模型上,对脊髓P2X7R的作用进行了研究,并对其机制进行了探讨。取得的主要结果如下: 1.脊髓小胶质细胞中P2X7R对慢性吗啡镇痛耐受形成和维持的影响 对胚胎大鼠(孕17d)脊髓原代混合培养细胞以及正常或吗啡耐受成年大鼠脊髓切片进行免疫荧光染色的结果显示,P2X7R仅分布在OX42阳性的小胶质细胞,而不位于星形胶质细胞或神经元。大鼠脊髓P2X7R蛋白水平随着吗啡耐受的形成而逐渐增加,在给药后第4d出现统计学差异。鞘内预先给予P2X7R的拮抗剂(oxATP或BBG)或针对P2X7R的小干扰RNA片段(P2X7siRNA)均能对吗啡镇痛耐受的形成产生抑制作用。在已经建立了吗啡镇痛耐受的实验大鼠上,每天皮下注射吗啡前30 min鞘内预先给予BBG,连续3天,对已经减弱的吗啡镇痛效能没有改善。提示,脊髓P2X7R参与慢性吗啡镇痛耐受的形成,但不参与耐受的维持。 2.脊髓P2X7R在吗啡耐受过程中增强神经元与胶质细胞的活化 脊髓小胶质细胞标志物Iba1、神经元激酶PKCγ与星形胶质细胞标志物GFAP的蛋白随着吗啡镇痛耐受的形成均出现表达增加,分别在吗啡注射的第2d、第4d及第6d与对照组相比出现统计学差异。鞘内预先给予BBG抑制P2X7R的功能或者给予P2X7

siRNA预先下调P2X7R的表达,均可显著抑制由长期吗啡注射引起的脊髓小胶质细胞中Iba1或p-p38的蛋白表达增加,同时抑制由慢性吗啡引起的GFAP及PKCγ的蛋白水平增高。这些结果表明,脊髓P2X7R通过影响神经元与胶质细胞的活化介导吗啡耐受。 3.脊髓促炎因子IL-18在P2X7R介导的吗啡耐受中的作用 大鼠脊髓中促炎症因子IL-18及其受体IL-18R的蛋白水平随着吗啡镇痛耐受的形成均逐渐增加,分别在吗啡注射的第4d和第6d与对照组相比出现统计学差异。形态学研究显示,IL-18主要位于脊髓小胶质细胞;而IL-18R主要位于星形胶质细胞,少量分布于神经元。鞘内预先给予拮抗IL-18功能的IL-18BP或IL-18Ab均能显著抑制吗啡耐受的形成。鞘内预先给予BBG或者P2X7 siRNA均能显著抑制慢性吗啡引起的脊髓IL-18、IL-1β以及pNFκB的表达增加。而鞘内预先给予IL-18BP,也可以显著抑制由长期吗啡注射引起GFAP及PKCγ的蛋白水平增高,但对小胶质细胞标志物Iba1或星形胶质细胞中pNFκB的表达变化没有显著影响。从而提示,脊髓小胶质细胞的促炎因子IL-18可能作为P2X7R下游靶点之一,通过介导星形胶质和神经元的激活而参与吗啡耐受过程。此外,NFκB参与了P2X7R介导的吗啡耐受过程,但不作为IL-18影响星形胶质细胞活化的主要通路。

selleck产品 GSI-IX核磁共振 综上所述,本研究首次揭示脊髓小胶质细胞特异性表达的P2X7R在吗啡镇痛耐受发展过程中发生了显著地改变,并且对吗啡镇痛耐受的产生而非维持有着重要的作用。此外,促炎因子IL-18作为其可能的下游机制之一,介导小胶质细胞-星形胶质细胞-神经元的级联反应,影响它们的活化,从而参与吗啡耐受的形成。这些结果拓展了胶质细胞参与吗啡镇痛耐受的可能机制,并且为临床上改善吗啡的长期镇痛效能提供了一个潜在靶点。
癌症是严重危害人类健康的主要疾病之一。攻克癌症一直是世界瞩目的研究课题。世界卫生组织调查表明,癌症患者正逐年增加,我国癌症发病人数在120万左右,每年死于癌症的人数多达90万人,与此同时,癌症的药物治疗近年来取得迅猛发展,新的抗癌药物不断涌现。喜树碱、紫杉醇以及维生素甲类化合物抗癌作用的证实是90年代抗癌药物的几大发现。喜树广泛分布于长江、川南、贵州以及云南等地区,资源十分丰富。喜树碱是从喜树中提取的一种生物碱,对喜树碱进行研究可以促进抗肿瘤药物的发展,使得资源得到充分的利用。 天然喜树碱具有显著的抗肿瘤活性,对消化道肿瘤、白血病、膀胱癌、卵巢癌等有强效的治疗效果,但是它易引起骨髓抑制,呕吐,尿血等毒副作用,且喜树碱不溶于水,难溶于酯,不便制成适宜的剂型,进一步限制了它应用。因此,针对喜树碱及其衍生物制剂的缺陷,常利用现代药剂学方法来达到提高溶解度、保持内酯环稳定、延长血中循环、提高药物靶向性的目的。目前已有较多的前体药物、微球、脂质体等多种形式的剂型。 轮烷是由一个或多个环状分子作“转子”(如CD)和一条或多条线形分子“作轴”(PEG)由非共价键组装成的超分子体系,当线状分子两端用大基团封闭时称为轮烷。由于组成聚轮烷上的CD和PEG与生物体有良好的相容性,具有很多功能化的位点,可以将药物包合在腔内,也可以键接在外侧的羟基上。并且还可将这些功能化的(准)轮烷键接到具有靶向作用的物质表面,实现靶向给药。已经有一些研究者将茶碱,肽类化合物键接在CD(准)轮烷上后,研究其释放规律,表明可以实现控制释放。 聚轮烷载体作为一种新型的载体材料,近年来不仅在化学界、材料界引起广泛关注,而且在生物与医药界也引起广泛的兴趣。聚轮烷作为药物载体的特色是: 1.材料本身虽是大分子但它由改性的环糊精CD与线型PEG组成。CD与PEG水溶性良好,且无毒副作用,为优良的载体材料。 2.改性CD环上有许多活泼羟基,通过活化CD上的羟基,可形成药物与载体的稳定的复合物polyplex。 3.

)Schott中分离的一种间苯三酚类化合物,文献报道具有一定的抗肿瘤活性,然而其诱导肿瘤细胞凋亡的机制至今未有深入报道。本文以绵马

)Schott中分离的一种间苯三酚类化合物,文献报道具有一定的抗肿瘤活性,然而其诱导肿瘤细胞凋亡的机制至今未有深入报道。本文以绵马素PB为研究对象,对其体外抗肿瘤活性和诱导凋亡的机制进行研究,发现绵马素PB通过调节PI3K/Akt/GSK-3β信号通路从而引起HepG2肝癌细胞凋亡。研究结果如下: 1.绵马素PB对多种肿瘤细胞株具有良好的增殖抑制作用。其中对HepG2细胞的抑制作用最强,IC50值是10.59±0.67μM,进一步检测结果表明,绵马素PB对HepG2细胞的增殖抑制作用是呈时间和浓度依赖的。然而,正常的小鼠单核巨噬细胞Raw264.7和小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的IC50值分别是42.50±0.54μM和38.19±0.92μM,远远大于HepG2细胞,说明绵马素PB对正常细胞株的毒性较小。另外,使用激光共聚焦显微镜从形态学角度观察绵马素PB作用于人肝癌HepG2细胞后的变化,可以看出其细胞染色质凝集并固缩,细胞核膜核仁碎裂成小片段形成凋亡小体。 2.绵马素PB能够诱导HepG2细胞发生凋亡。首先,使用罗丹明123染色法检测绵马素PB作用于人肝癌HepG2细胞后线粒体跨膜电位的变化,结果呈现明显地下降趋势。其次,采用琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带(DNA Ladder)的产生,可以看出加入绵马素PB后的HepG2细胞的泳道内均有明显的DNA Ladder出现。最后,利用AnnexinV-FITC/PI双染试剂盒检测细胞凋亡百分率,结果显示绵马素PB作用于HepG2细胞48h后,细胞的凋亡百分率显著升高,并且呈浓度依赖的方式。

Selleck GS-1101 3.绵马素PB通过调节PI3K/Akt/GSK-3β信号通路从而引起HepG2肝癌细胞凋亡(1)绵马素PB可以抑制PI3K的表达,抑制Ser473Akt的磷酸化,抑制Ser9GSK-3β的表达,随后上调NAG-1的表达。相似地,加入PI3K抑制剂渥曼青霉素后,各蛋白的表达效果和绵马素PB作用一致。该结果说明PI3K/Akt/GSK-3β信号通路可能是绵马素PB作用于HepG2肝癌细胞的主要分子机制之一。 而且 (2)绵马素PB诱发了caspase-3的激活和PARP的裂解。用广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理HepG2细胞2h后,可明显地抑制二者的变化。这说明绵马素PB诱导的HepG2细胞凋亡是通过caspase所依赖的途径。 综上所述,绵马素PB在不影响正常细胞生长的状况下,可以有效地抑制HepG2肝癌细胞的增殖,这种增殖抑制作用与其诱导的细胞凋亡密切相关。绵马素PB通过caspase所依赖的途径诱导HepG2肝癌细胞发生凋亡,其中PI3K/Akt/GSK-3β/NAG-1信号通路可能作为最主要的分子机制之一。上述研究结果将对绵马素PB进一步的研究并开发为新药提供良好的理论基础。
世界范围内,乳腺癌发病率与死亡率高,是影响女性健康的重要疾病。其中HER-2(Human

epidermal growth factor receptor-2)蛋白过表达乳腺癌,传统检测易误诊、漏诊,在治疗过程中易产生副作用及引发不良预后。随着纳米科技理论的进步及纳米颗粒制备工艺的改善,因金纳米颗粒独特的理化特性,将其引入肿瘤医学领域,对乳腺癌的检测与治疗有创新意义。

目的 通过金纳米颗粒制备及曲妥珠金纳米探针合成,探讨颗粒毒性、探针暗场应用及处理乳腺癌细胞实验效果,为乳腺癌纳米医学诊断与治疗研究提供依据。 方法 以柠檬酸盐还原法制备金纳米颗粒(Gold nanoparticles,GNPs),对颗粒进行透射镜(TEM)表征及紫外吸收光谱检测,通过静置检测金纳米颗粒时间稳定性;GNPs通过静电作用吸附曲妥珠单抗(Herceptin),进而合成曲妥珠金纳米探针(GNP@Herceptin),表征及稳定性检测方法同GNPs;中科院上海细胞库购买人乳腺癌细胞株MCF-7、SK-BR-3,免疫组化检测细胞HER-2蛋白表达;利用扫描电镜(SEM),检测定位于细胞膜表面GNP@Herceptin,并在暗场环境下观察细胞膜上GNP@Herceptin;设置0-400mg/mL7浓度梯度GNPs,并设置培养液空白组,细胞增殖抑制剂盒检测GNPs细胞毒性;设置0-200ng/mL7浓度梯度GNPs、Herceptin和GNP@Herceptin,并设置培养液空白组,细胞增殖抑制试剂盒检测MCF-7与SK-BR-3细胞增殖抑制效果;设置0-1.0μg/mL4浓度梯度Herceptin、GNP@Herceptin,细胞凋亡试剂盒检测SK-BR-3细胞凋亡,细胞周期试剂盒检测SK-BR-3细胞周期阻滞;运用SPSS21.0对同种细胞不同浓度颗粒毒性、抗体与探针增殖抑制、细胞凋亡及周期阻滞数据进行单因素方差分析,同一浓度两种细胞颗粒毒性数据及抗体与探针最佳处理剂量采用两组独立样本t检验,检验水平α为0.05。 Cilengitide购买 结果 金纳米颗粒近似圆形,粒径大小(14.11±1.13) nm,并可与曲妥珠单抗成功吸附,溶液澄清透亮,稳定性好;GNPs与Herceptin结合率为2.25:1,结合效果好;通过SEM检测,可发现定位于细胞膜表面的GNPs@Herceptin,并且在暗场环境下,可看到SK-BR-3细胞周围的橘黄色生物探针;GNPs浓度在400μg/mL时,MCF-7细胞存活率减少至43.9%(t=39.709,P=0.001),在100μg/mL时,SK-BR-3细胞存活率为65.1%(t=6.796,P=0.002),均有明显细胞毒性效果,但金纳米颗粒浓度下降至50μg/mL时,SK-BR-3与MCF-7细胞生存率分别为82.8%(t=1.979,P=0.119)、99.3%(t=0.177,P=0.868),且未显示出细胞增殖抑制效果,说明低浓度GNPs有良好的生物相容性。Herceptin处理SK-BR-3细胞后,最佳用药剂量为7.143ng/1×104细胞,GNP@Herceptin处理细胞后最佳用药量从50ng/mL降低至25ng/mL,且差异具有统计学意义(t=14.

Activity and safety of Nivolumab,an anti-PD-1immune checkpoint

Activity and safety of Nivolumab,an anti-PD-1immune checkpoint

inhibitor,for patients with advanced,refractory squamous non-small-cell lung cancer(Check Mate 063):A phase 2,single-arm trial[J].Lancet Oncol,2015,16(3):257-265.2证据水平2b。
MTH1(mut T homolog1)是Mut T的同源酶,是一种核苷酸焦磷酸酶,主要参与DNA损伤修复过程,尤其在肿瘤细胞的DNA复制过程中发挥着重要角色。最新的研究表明,MTH1可以清除肿瘤细胞中受损DNA功能结构的氧化构件,使得肿瘤细胞继续分裂与增殖,从而维持肿瘤细胞的生存,而更为重要的是正常细胞不需要MTH1,因此,MTH1有可能只与异常的细胞生长密切相关,这使得MTH1作为治疗靶点成为人们关注的焦点。该文着重对MTH1与肿瘤关系最新的研究成果进行综述,探讨MTH1维持肿瘤生长的相关机制及其与肿瘤治疗的关系,为靶向MTH1治疗肿瘤提供新的思路,为肿瘤研究工作者提供重要参考。
目的:研究p16及Bmi-1基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征的关系。方法:选择2007年3月至2013年12月确诊的95例NSCLC细胞块标本(观察组)及95例正常癌旁组织(对照组),应用免疫组化法检测两组中p16及Bmi-1基因的表达并进行比较。结果:观察组p16基因的总阳性率为16.8%(16/95),明显低于对照组的90.5%(86/95)(P<0.05);在高-中、低分化肿瘤中p16的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);Bmi-1基因表达在有无淋巴结转移的阳性率比较差异有统计学意义(P
背景与目的对于伴表皮生长因子受体(epidermal AMN-107分子量 growth factor receptor,EGFR)敏感型突变的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者,小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine selleck化学 kinase inhibitor,TKI)的显著疗效众所周知。但对于晚期NSCLC伴EGFR-L861Q突变的患者,TKIs治疗是否敏感,治疗时机和治疗方案该如何选择,至今尚无确切的循证医学证据。本研究旨在通过分析EGFR-L861Q与敏感突变型EGFR-L858R及野生型EGFR蛋白质空间构象的差异,结合临床实例探讨晚期NSCLC伴EGFR-L861Q突变患者的最佳治疗方案。方法利用同源模建重建野生型EGFR、敏感突变型EGFR-L858R及突变型EGFR-L861Q蛋白质的空间构象,并分析这三种空间构象之间的差异。结果敏感突变型EGFR-L858R与野生型EGFR蛋白质的空间构象差异显著。突变型EGFR-L861Q与敏感突变型EGFR-L858R及野生型EGFR的蛋白质空间构象均不完全相同。在临床中,我们总结了1例晚期NSCLC伴EGFRL861Q突变的患者,应用化疗作为一线治疗,当肿瘤不再缩小时,换用TKIs维持治疗,复查肺部计算机断层扫描(computed

tomography,CT),肿瘤较前相比进一步缩小。结论通过对突变型EGFR-L861Q的蛋白质空间构象进行分析比对,结合临床实例,对于晚期NSCLC伴EGFR-L861Q突变的患者,一线化疗后达到疾病控制时,换用TKIs维持治疗,可能获得令人满意的临床疗效。
Gastric Integrase 抑制剂 cancer remains one among the leading causes of cancer-related deaths, regardless of its decreasing incidence and newly available treatment options. Most patients present at an advanced stage and are treated with upfront systemic chemotherapy. Those patients receiving first-line therapy may initially respond to treatment, but many of them relapse over time. In such condition, second-line treatment for disease progression remains the only available option. Although there exists no standard approach in the second-line setting, several phase Ⅲ trials have shown modest survival benefit in patients receiving irinotecan, taxane and ramucirumab over the best supportive care or active agents. This review analyzes the currently available treatment regimens and future directions of research in the second-line setting for metastatic gastric cancer with the best available evidence.

3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果

3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果 17-AAG能够下调HepG2细胞PAI-1的表达,HepG2细胞内HBV复制中间体表达水平明显降低,HBsAg的表达亦受到抑制,但上调或阻断TGFβ信号通路对HBV复制影响不明显。结论 HSP90参与肝细胞内TGFβ信号通路的活化,其抑制剂17-AAG能够抑制HBV的复制与蛋白表达,但该抑制作用与TGFβ信号通路活化无关。

以Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc等转录因子于体细胞中异位表达,可获得具有胚胎干细胞特性的诱导性多能干细胞(iPSCs),但是iPSCs技术的重编程效率和应用于临床上的安全性却都很低。目前,iPSCs的研究集中于3个方面:一是增加iPSCs技术的重编程效率;二是增加iPSCs应用于临床时的安全性;三是开创新的构建iPSCs的方法。第一个方面通过调整体细胞的表观遗传特性和细胞信号网络来达到;第二个方面可通过减少致癌性因子的使用及选择合适的载体系统来达到。而且,一些小分子化合物和调节细胞信号网络的方法也被用于诱导体细胞重编程为iPSCs。相对于仅仅使用转录因子重编程体细胞为iPSCs,使用小分子化合物或调节细胞信号网络的方法重编程体细胞为iPSCs的效率更高,而且通过这种方法获得的iPSCs的有更高的临床安全性。新构建iPSCs的方式与依赖含转录因子表达载体构建iPSCs的传统模式区别较大,它们的临床安全性或(和)重编程效率也得到了极大提高。使用4个转录因子的重组蛋白或体外合成并修饰的转录因子的mRNA已经能成功构建iPSCs;而使用miRNAs高效率重编程小鼠和人的体细胞为iPSCs的方法则开创了脱离转录因子重编程体细胞的全新策略。
目的:总结Nodal及其信号调控与肿瘤发生、发展的关系,并探讨针对Nodal的抑制策略在肿瘤治疗中的应用价值。方法:以”Nodal、信号通路和肿瘤”等为关键词,检索2000-01-2011-12PubMed及CNKI期刊全文数据库。纳入标准:1)Nodal结构及生物学作用;2)胚胎发育及肿瘤发生中Nodal信号调控的区别;3)Nodal与肿瘤恶性度的相关性;4)抑制Nodal信号通路的肿瘤治疗策略可行性。根据纳入标准,符合分析的文献40篇。结果:Nodal在肿瘤组织重新高表达,其信号参与了肿瘤发生、血管生成和侵袭转移等进程,并受到其他信号通路的调控。Nodal在肿瘤的发生、发展中扮演重要角色,但其机制有待明确。结论:深入探究Nodal在胚胎发育和肿瘤发生过程中功能上的区别及相似之处,阐明Nodal相关信号通路及其中的关键分子,可能会为恶性肿瘤的临床诊治提供新靶点和新思路。
微小RNA(micro

PI3K Inhibitor Library购买 RNA,miRNA)是一类非蛋白质编码调控小RNA,长度约为22nt。由于miRNA不编码蛋白质,限制了其生物学功能的应用。目前的研究主要是关于miRNA调控单一组织的限制性转录,即一类编码一种转录因子,控制影响细胞增殖、分化、凋亡及个体生长发育,miRNA能对成骨分化过程产生正向、负向调控作用。本文就miRNA对成骨细胞分化的调控研究进展进行综述。
上皮-间质转化(EMT)是肿瘤细胞获得侵袭和转移能力的最主要途径。转化生长因子β(TGF-β)是已知诱导肿瘤细胞发生EMT的关键因子。本文系统介绍TGF-β及其诱导肿瘤细胞发生EMT的信号通路,并综述抑制EMT发生的新抑制剂。
目的提高人诱导性多能干细胞(hiPSC)转化效率,缩短其产生周期,并避免引入异源基因。方法利用GP2-293反转录病毒包装系统对人包皮成纤维细胞(HFFs)进行转化,引入小分子物质,并对类胚胎干细胞(ESC)克隆进行独立培养,检测标记蛋白,定向诱导分化能力和核型分析。结果

已经 获悉更多 HFFs经转化后,20 d出现形态与ESC克隆相似的hiPSC,比经典法缩短了10 d,效率提高约12倍。它们与ESC同样表达标记蛋白;体外成功定向分化为心肌细胞。核型分析表明该hiPSC染色体核型正常。结论建立稳定的转化效率高、周期短的hiPSC生成体系,并成功诱导分化成心肌细胞,为心血管疾病的模型构建和临床研究提供实验基础。
心肌纤维化(MF)是多种心脏疾病发展到一定阶段的共同病理改变,是心肌重构的主要表现之一。这种病理变化存在于多种心血管疾病中,与心律失常、心力衰竭等疾病密切相关。转化生长因子-β(TGF-β)在MF的发生和发展中起着重要作用。TGF-β/Smads信号通路是TGF-β发挥生物学作用的主要通路,其分子组成与分子调节复杂,现将它在MF发生和治疗中应用前景作一综述。
目的探讨转化生长因子(TGF-β1)通过调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)分子影响肺纤维化进程的重要机制。方法应用博来霉素构建KM鼠肺纤维化模型,设置联合TGF-β1+SB-431542组、单纯TGF-β1组、联合TGF-β1+LY294002组、对照亚组、空白组,于建模后3、7、14、28d检测各组羟脯氨酸(HYP)含量;应用免疫组化技术检测各组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)蛋白表达;应用方差分析法比较各组PI3K表达差别。结果相对空白组,实验各组PI3K明显高表达,主要分布在细胞核外;单纯TGF-β1组,PI3K及羟脯氨酸(HYP)含量明显高于其余联合TGF-β1+LY294002组。结论 PI3K可能参与TGF-β1调节肺纤维化过程的机制,抑制PI3K的表达,可能可以阻碍肺纤维化疾病发展。
目的探讨红细胞生成素(EPO)对人白蛋白诱导的正常人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化的作用。方法将体外培养的HK-2细胞随机分为空白对照组(未加任何刺激物)、EPO诱导组(EPO终浓度为20 U/mL)、白蛋白诱导组(白蛋白终浓度5 mg/mL)、EPO干预组(EPO终浓度分别为5、10、20 U/mL)及转化生长因子β1(TGF-β1)拮抗剂组(SB431542终浓度为10μmol/L,加入SB431542 30 min后加白蛋白,白蛋白终浓度为5 mg/mL),各组均刺激24 h。应用RT-PCR法检测细胞TGF-β1 mRNA的水平;细胞免疫荧光法检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达;ELISA法检测上清液纤维连结蛋白(FN)的蛋白表达。结果 RT-PCR结果表明白蛋白诱导组TGF-β1 mRNA较空白对照组显著升高(P<0.05);细胞免疫荧光及ELISA结果显示白蛋白诱导组E-cadherin的蛋白表达较空白对照组显著下降,α-SMA、FN的蛋白表达显著上升(P<0.

15%,在非吸烟或轻度吸烟(≤10包/年或戒烟时间长达1年以上者)的非小细胞肺癌患者组织中的表达率为11 86%,二者在非小细胞肺

15%,在非吸烟或轻度吸烟(≤10包/年或戒烟时间长达1年以上者)的非小细胞肺癌患者组织中的表达率为11.86%,二者在非小细胞肺癌患者组织中的表达率有差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。将非小细胞肺癌按病理类型分为腺癌和非腺癌两大类(非腺癌中包括鳞癌、大细胞癌及其他类型非小细胞肺癌),其中腺癌患者EMLA-ALK基因阳性表达率为14.91%,非腺癌患者的EMLA-ALK基因阳性表达率仅为0.76%,二者之间的差异具有统计学意义(P0.05)。根据患者的临床分期分组,可见低分期组(Ⅰ+Ⅱ期)中EML4-ALK基因的阳性表达率为5.14%,高分期组(Ⅲ

screening assay Ⅳ期)中EML4-ALK的阳性表达率为12.56%,且此种差异具有统计学意义(P
背景与目的: 肺癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,化疗药物因其毒副作用影响了对肺癌的治疗价值。近年来随着对肺癌发病机制及分子靶向治疗深入研究,人们研究发现80%以上的肺癌患者EGFR高表达,针对EGFR分子治疗的药物有多种,其中EGFR胞内酪氨酸激酶的小分子抑制剂,即EGFR-TKIs在临床研究发现,EGFR-TKIs对于大部分EGFR突变的患者,初始有非常好的疗效,尤其对突变类型为19外显子的缺失突变和21外显子的L858R点突变患者,随着药物应用时间的延长,都不可避免的产生耐药。关于获得性耐药的机制主要包括EGFR的T790M二次突变和MET基因扩增,约占70%,尚有30%-40%的耐药机制不清楚,主要有PTEN表达缺失或功能异常、IGF-1R高表达、HGF高表达等。为进一步研究EGFR-TKIs获得性耐药机制,我们利用前期已经诱导成功的耐药细胞株HCC827-TR和敏感株HCC827-P,通过用不同方法对已知EGFR-TKIs获得性耐药机理的筛查。 已知最常见的获得性耐药机制是EGFR的20外显子发生T790M二次突变,而肿瘤的活性仍然依赖EGFR信号传导通路,因此如何阻断EGFR信号传导通路是克服耐药的关键。目前主要逆转耐药的研究包括联合EGFR单抗治疗、不可逆的EGFR-TKIs抑制剂和T790M突变抑制剂。本课题主要对不可逆的EGFR-TKIs抑制剂阿发替尼进行研究。介于H1975和H1650细胞株分别为EGFR外显子21的点突变(L858R)和外显子19的缺失突变(E746-A750del),其中H1975同时伴发外显子20的二次突变(T790M),我们选用H1975和H1650细胞株进行有关实验,初步探讨阿法替尼逆转EGFR-TKIs获得性耐药可能性。

方法: 1.人体外培养HCC827-P、HCC827-TR细胞。提取总RNA,进行反转录成cDNA,通过Realtime-PCR检测二者细胞内PTEN基因mRNA表达水平。 或者 2.Western-blot检测HCC827-P和HCC827-TR细胞中PTEN的表达水平,同时检测经5μM Erlotinib处理2h后的HCC827-P和HCC827-TR细胞中EGFR下游靶蛋白p-AKT表达水平。 3.MTS检测Afatinib和Erlotinib在H1975和H1650细胞系中的毒性作用。 结果: 1. Realtime-PCR检测结果显示HCC827-TR和HCC827-P细胞系中二者的PTEN mRNA表达水平不一致;其中HCC827-TR细胞系的PTEN基因mRNA表达水平较HCC827-P细胞系低。 2. Western-blot检测显示HCC827-TR细胞中PTEN蛋白表达缺失;给予EGFR-TKI抑制剂Erlotinib5μM处理2h后,HCC827-P细胞系的下游信号蛋白p-AKT明显被抑制,未经Erlotinib处理的HCC827-TR细胞中p-AKT水平轻度上调。 所以 3. Afatinib对H1975存在生长抑制作用。当Afatinib和Erlotinib药物浓度均为10μM时,二者对H1975的生长抑制率分别为58%、14%,IC50分别为9.03μM和33.16μM。Afatinib对H1650的生长抑制作用强于Erlotinib,当Afatinib和Erlotinib药物浓度均为0.001μM时,二者对H1650的生长抑制率分别为15%、6%,IC50分别为8.45μM和19.82μM

结论: 1. HCC827-TR对Erlotinib获得性耐药机制可能与PTEN蛋白表达下调导致的p-AKT持续活化有关。 2. Erlotinib可显著抑制HCC827-P细胞内EGFR下游的PI3/AKT信号通路,而对HCC827-TR细胞的抑制作用不显著。 3. Afatinib能够逆转由T790M突变导致的耐药,对于由PTEN蛋白表达缺失或下调引起的耐药也有一定程度的逆转作用。
目的验证新型单抗D5F3结合罗氏Ventana全自动免疫组化机是一种灵敏度及特异度较高的可以用来筛选非小细胞肺癌中药物靶点ALK的候选方法;探讨肺腺癌中ALK融合基因及融合蛋白表达的相关性;检测肺腺癌支气管镜活检标本中ALK融合基因及融合蛋白表达状况及二者与临床病理的相关性。 方法选取细胞株H2228(ALK阳性)及CALU-3(ALK阴性)分别进行荧光原位杂交法及免疫组化法检测;从北京协和医院病理外检标本筛选20例ALK阳性病例进行VANTANA免疫组化染色;筛选230例肺腺癌手术标本制成芯片,分别进行荧光原位杂交及免疫组化法检测;从北京协和医院病理科标本库中筛选65例中晚期浸润性肺腺癌支气管镜活检标本,分别进行荧光原位杂交法及免疫组化法检测。 结果肺腺癌中ALK融合基因和ALK融合蛋白部分不相符;对于活检标本,FISH检测阳性率7.