方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和p38MAPK抑制剂SB203580干预,采用Western印迹检测p38MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白(p-p38MAPK、p-CREB1)的表达,半定量RT-PCR检测CTGF和纤维黏连蛋白(FN)mRNA的表达。放免法测定细胞上清液中层黏连接蛋白(获悉更多LN)和IV型胶原的分泌含量。结果:与低糖组和低糖加甘露醇组相比,高糖组系膜细胞p-p38MAPK、p-CREB1表达明显上调,CTGF和FN mRNA的表达增加,细胞上清液中FN和IV型胶原含量增加。SB203580能够明显抑制高糖培养系膜细胞p38MAPK和CREB1的磷酸化CX-5461说明书,下调CTGF和FN mRNA表达,抑制细胞上清LN和Ⅳ型胶原的分泌。结论:p38MAPK信号途径可能参与高糖诱导的肾小球系膜细胞CTGF的表达和细胞外基质的分泌。”
“目的:寻找蒙花散的药物作用靶点。方法:通过测定340 nm处光密度的下降速率,间接测定醛糖还原酶的活性的方法或者,建立醛糖还原酶抑制剂筛选模型;以及通过检测荧光素酶基因的表达状况评价化合物对过氧化物酶体增殖物激活受体的激动活性的过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂筛选模型,共同评价蒙花散240个样品的药理活性。结果:蒙花散对醛糖还原酶有较强的抑制作用,其半数抑制浓度是790 mg/L;蒙花散对过氧化物酶体增殖物激活受体有激动作用。结论:蒙花散治疗糖尿病并发症有2个作用靶点。