5的为下调,FC在0.5到2之间为无显著变化。结果表明,0.5h时有154个基因上调表达,188个基因下调表达；1h时有213个基因上调表达,223个基因下调表达；3h时有531个基因上调表达,665个基因下调表达。3个时间点都上调的基因有75个,都下调的基因有81个。 进一步对差异表达的TCS基因分析发现,SSU05_0427、SSU05_0906、 SSU05_0944、SSU05_1358、SSU05_1595、SSU05_1660和SSU05_1685等7个基因一直上调表达；而SSU05_0883、SSU05_2090,2个基因一直下调表达；SSU05_0430、SSU05_1910和SSU05_2148,3个基因先下调表达后上调表达；SSU05_1094基因先上调表达,然后下调表达。
3.TCS基因缺失突变株对致病性和炎症反应的影响 在SS2与天然免疫细胞猪中性粒细胞的相互作用过程中,双组份调控系统基因呈现不同的表达情况,且在不同时间发挥作用。1094HK/RR、1660HK/RR和1910HK/RR基因分别在免疫反应的早期、中期和后期发挥作用。 以CD-1小鼠为模型,动物实验结果表明,双组份调控系统基因1910HK/RR、1094HK/RR和1660HK/RR缺失后,降低了宿主促炎症因子的表达水平,在12小时宿主炎症反应最为强烈；SS2抵抗PMNs吞噬的能力,以及SS2的致病性明显降低。
心肌重构是一种引起多种心血管疾病发病率和死亡率显著升高的独立危险因素，可引起心力衰竭和恶性心律失常，最终导致死亡。逆转左心室肥大和重构已成为当前抗高血压和治疗慢性心力衰竭的重要目标之一。汇利心康（HLXK）是本实验室针对在心肌重构过程中发挥关键作用的Gq蛋白α亚单位羧基末端，设计制备的一种多肽药物，能通过抑制Gq蛋白信号传导，有效抑制血管紧张素Ⅱ和去甲肾上腺素诱导的离体心肌细胞肥大反应，以及多种不同动物模型的心肌重构。 MK-8776半抑制浓度 Capmatinib分子重量 然而，心肌细胞的信号转导系统是一个十分复杂的网络，由众多的神经体液分子、受体、G蛋白、效应器、第二信使、转录因子等共同组成。其中多个信号分子之间都存在着反馈调节和交互作用，任何一个节点的变化都可能对整个网络系统产生影响，从而精细调控整个细胞的信号转导乃至组织器官功能。HLXK拮抗Gq功能后，不仅会影响Gq蛋白下游信号分子的表达和功能，而且可能对其他通路的信号分子产生影响。因此，研究HLXK对心肌细胞信号转导网络的影响不仅有助于进一步深入理解其抗心肌重构作用机制，而且有助于了解其对心肌功能的整体影响。
方法： 1.动物分组：SHR雄性大鼠18只，随机分为模型组、氯沙坦组和HLXK组(n=6)，分别给予生理盐水（normal saline, NS）2ml/kg（ip, bid)、氯沙坦6mg/kg（ig, qd)和HLXK90μg/kg（ip, bid)，连续8W；并设立WKY大鼠正常对照，给予NS(2ml/kg, ip, bid)，连续8W。 2.实验过程中，密切观察大鼠的一般情况及其死亡情况。末次给药后，称量体重，颈椎脱臼处死，称重法测定大鼠的心脏指数和左心室指数。 3.采用定量PCR芯片技术检测大鼠心肌组织中心肌重构相关通路的信号分子表达情况。 4.结合PCR芯片筛选结果，采用Real-time PCR和Western blot进行验证。 结果： 1．与WKY大鼠相比，SHR出现明显心肌重构；HLXK能明显降低SHR大鼠的心脏指数和左心室指数，改善左心室重构； 2．在SHR心肌重构信号传导网络中，信号转导分子表达明显上调的有Serpine1、Jun、S1pr3、Max、Grm1、Il1r1、Cdkn1a、Crhr1、Chhr2、Ctgf、Edn1、Fgf2、Bcl2l1、AC5和Akt1；表达明显下调的有Bai1、Ccnd1、Gcgr、Nos2(iNOS)、Pik3cg、Ptgdr、Sctr、Tnf和Vcam1。
3．RT-PCR芯片结果显示HLXK能有效抑制Cdkn1a、Ctgf和Edn1基因表达，上调Grm4、Nos2和Tshr基因的表达。 hypoxia-inducible factor pathway 4．HKXK能明显增加SHR α-MHC mRNA的表达，降低CaN mRNA、CDKN1AmRNA和β-MHC mRNA的表达； 5．HKXK能明显增加SHR α-MHC蛋白表达，降低CaN、CDKN1A和β-MHC蛋白表达。 结论： 1．自发性高血压大鼠发生明显心肌重构，其心肌细胞信号转导网络明显紊乱，数条信号通路的多种神经体液因子、生长因子、受体、效应酶，细胞周期调节蛋白、癌基因和肥大相关基因表达失衡。 2.多肽药物汇利心康能明显改善SHR心肌重构。 3．汇利心康抑制心肌重构作用与其下调CDKN1A、CTGF、ET-1、CaN表达，上调GRM4、NOS2和TSHR表达，纠正α-MHC和β-MHC的表达失衡有关。
目的体外培养骨骼肌L6细胞，诱导其分化成熟，采用棕榈酸诱导的方法，建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗（IR）模型。给予不同条件的人工干预，探讨骨骼肌源性脂联素对胰岛素抵抗模型中GLUT4表达的影响，及其中p38MAPK信号通路的地位和作用。 方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞并诱导分化为成熟骨骼肌L6细胞，给予不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L）的棕榈酸（PA），并应用葡萄糖氧化酶法分别测定不同时间（2、4、8、12、24、36h）细胞培养上清液葡萄糖浓度，观察不同浓度PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响，据此判断胰岛素抵抗模型建立成功与否。（2）根据干预条件的不同，实验分为四组：NC组（对照组，骨骼肌L6细胞组）；NC+SB组(对照+阻滞剂SB203580组)；IR组（胰岛素抵抗模型组）；IR+PIO组(胰岛素抵抗模型+吡格列酮组)。应用Western blot方法分别测定上述四组APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表达水平。 结果(1)0.4mmol/L的棕榈酸在作用12、24、36h以及0.6，0.8mmol/L棕榈酸作用8、12、24、36h，或1.0mmol/L棕榈酸作用4、8、12、24、36h后，细胞培养上清液中葡萄糖含量，明显高于对照组（P＜0.05）。据此判断胰岛素抵抗模型建立。（2）Western blot结果显示：①与NC组比较，IR组APN和GLUT4蛋白表达减少，差异有统计学意义（P＜0.05），而p-p38MAPK虽减少，但无统计学意义（P＞0.05）；②与NC组比较，NC+SB组p-p38MAPK和GLUT4的蛋白表达减少（P＜0.05），差异有统计学意义，尽管APN蛋白表达水平减少，但无统计学意义（P＞0.05）；③与IR组比较，IR+PIO组其APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表达增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论1.大鼠L6肌细胞株通过培养并分化成熟后，经过一定浓度和时间的棕榈酸诱导，可以建立大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型；2.大鼠L6肌细胞可以分泌和表达脂联素，并影响L6肌细胞GLUT4蛋白的表达；3.