不同剂量芥子气所致小鼠染毒耳郭皮肤损伤模型的建立 芥子气所致皮肤损伤的严重程度与染毒剂量有关，染毒剂量越高，皮肤肿胀越明显。本研究采用文献中常用的32mg/mL芥子气5μL（低剂量）和在溶剂中达最大溶解度，即128mg/mL，5μL（高剂量）两个染毒剂量建立了不同损伤程度的芥子气小鼠耳郭染毒皮肤损伤模型，肿胀率分别为154.7%和204.8%。 2.甾体类抗炎药地塞米松对芥子气耳郭染毒小鼠皮肤损伤的影响 染毒前30min灌胃给予甾体类抗炎药物地塞米松（5mg/kg）对芥子气染毒小鼠耳郭肿胀无影响。 3.非甾体类抗炎药吲哚美辛抗芥子气损伤的药效评价 染毒前30min灌胃给予非甾体类抗炎药吲哚美辛（10mg/kg）对高、低剂量芥子气染毒小鼠耳郭肿胀均有显著地抑制作用，肿胀抑制率分别是40.0%和25.7%。

二、新型具有抗炎活性药物抗芥子气损伤的药效评价 芥子气致伤机制复杂，涉及多种炎性反应环节，因此本研究还进一步针对芥子气致炎的其它环节开展了研究。 1.辣椒素受体激动剂抗芥子气损伤作用评价 辣椒素受体激动剂可通过耗竭P物质抑制炎症反应，代表药物为奥伐尼。临床上用于减轻神经性炎症以及镇痛止痒等。目前仅有少量文献报道，其减轻芥子气所致皮肤损伤，但作用特点尚不明确。本研究以非甾体抗炎药吲哚美辛为阳性对照，考察了奥伐尼对染毒皮肤损伤的影响。结果表明，局部涂抹给予奥伐尼（0.125、0.25和0.05mg/耳）对低剂量芥子气染毒小鼠耳郭肿胀均有显著地抑制作用，且强于吲哚美辛，肿胀抑制率分别是68.2%、87.0%和81.6%；奥伐尼对高剂量芥子气染毒小鼠耳郭肿胀无明显影响。 进一步采用伊红-苏木素染色，观察奥伐尼对低剂量芥子气染毒耳郭皮肤病理损伤的影响。结果表明，奥伐尼可显著降低芥子气诱导炎性细胞浸润和表皮细胞坏死，且保护作用强于吲哚美辛。

Afatinib价格 2. p38抑制剂抗芥子气损伤活性筛选与评价 p38激酶居于炎性反应的中央环节，其抑制剂是近年来抗炎免疫药理学研究的热点之一。BIRB796是第一个进入III期临床试验的p38抑制剂。本课题与化学合成实验室合作，获得了50个BIRB796类似物，并对它们的抗芥子气损伤活性进行了筛选和评价。 2.1BIRB796类似物的抗炎活性初筛 采用LPS诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的体外模型，以p38抑制剂SB203580作为阳性对照，观察了50个化合物的抗炎活性。结果表明，化合物p38-98、p38-99、p38-123细胞毒性低，且可显著性抑制LPS诱导TNF-α分泌，IC50分别为10.33μM、48.92μM和19.39μM。 2.1.1p38抑制剂抗芥子气损伤细胞水平药效评价 2.1.1.1p38抑制剂对芥子气染毒HaCaT细胞活力的影响 采用芥子气染毒HaCaT细胞模型，观察了p38抑制剂SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99对染毒细胞的保护作用。结果表明，SB203580、BIRB796、p38-98、p38-99在染毒后6h时可显著改善200μM芥子气所致细胞活力的降低。 没有 或者 2.1.1.2p38抑制剂对芥子气染毒HaCaT细胞IL-6和IL-8分泌的影响 采用芥子气染毒HaCaT细胞模型，观察了p38抑制剂SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99对染毒细胞炎性介质分泌的影响。结果表明，SB203580、BIRB796、p38-98、p38-99均可显著地抑制炎性细胞因子IL-6和趋化因子IL-8的分泌，并呈良好的剂量依赖关系。在两种p38抑制剂代表化合物中，BIRB796抑制作用强于SB203580。

2.1.2p38抑制剂抗芥子气损伤整体动物水平药效评价 2.1.2.1p38抑制剂对芥子气耳郭染毒小鼠皮肤损伤的影响 染毒前24h、30min以及染毒后12h腹腔注射给予SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99（10mg/kg），考察了上述p38抑制剂对染毒皮肤损伤的影响。结果表明，除SB203580外，BIRB796、p38-98、p38-99对耳肿胀均有一定的抑制趋势，抑制率分别是20.5%、17.4%和17.8%。 2.1.2.2p38抑制剂对芥子气全身中毒小鼠存活的影响 采用芥子气40mg/kg（LD99）进行皮下注射染毒建立芥子气全身中毒模型，静脉注射给予p38抑制剂SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99（5mg/kg/d），观察小鼠染毒7天内的死亡情况。结果表明，模型组小鼠于染毒第5天全部死亡，药物处理组小鼠分别于染毒第6天和第7天全部死亡，提示p38抑制剂对全身中毒小鼠的存活率无明显影响 2.1.2.3p38抑制剂中活性化合物代谢稳定性研究 采用大鼠肝微粒体模型，对SB203580、BIRB796、p38-98、p38-99进行初步的代谢稳定性分析。结果表明，p38-98在大鼠肝微粒体中孵育60min后原型剩余量达到50%。提示p38-98具有较好的代谢稳定性。 2.1.3SB203580和BIRB796抗芥子气损伤机制研究 从药效评价结果可知，变构型p38抑制剂BIRB796对芥子气炎性损伤的保护作用强于竞争性p38抑制剂SB203580。本研究从对应激活化蛋白激酶（stress-activated proteinkinases，SAPKs）c-Jun氨基末端激酶（c-Jun Nterminal kinase，JNK）与p38活性的影响的角度，对SB203580和BIRB796的抗炎机制进行了考察。 2.1.4芥子气诱导染毒HaCaT细胞p38和JNK激酶活化 首先采用Luminex液相芯片技术，考察了芥子气对HaCaT细胞p38与JNK磷酸化的影响。结果表明，芥子气可迅速诱导p38和JNK激酶磷酸化水平升高，并在染毒后0.5h达到高峰。 2.1.