0统计软件进行数据处理。实验数据用均数±标准差((?)±s)表示。两样本均数间的比较采用独立样本t检验；多样本比较采用完全随机资料的方差分析法(单因素方差分析法，one-way ANVON)处理。以a=0.05作为显著性检验水准。 结果 (1)模型制成后，缺血再灌注模型组和PACAP组大鼠均出现不同程度的精神萎靡、右侧肢体肌力减弱。PACAP治疗组与缺血再灌注模型组比较明显降低了2、12、24、48hr时间点的神经功能学评分，差别有统计学意义(P＜0.05)。 (2)各组病理切片苏木素-伊红(HE)染色观察：假手术组无梗死灶，神经元形态结构正常。缺血再灌注模型组大鼠脑皮层可见明显梗死灶，缺血中心区损伤神经元不同程度肿胀、变性、坏死，少见正常神经元，有大量炎性细胞浸润，梗死灶周围出现固缩浓染细胞。PACAP组梗死灶小，受损神经元数目和炎性细胞数目较缺血再灌注模型组少，周围固缩浓染的细胞数明显减少。
(3)假手术组皮层偶见极少数的TUNEL染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层半影区可见较多凋亡细胞。PACAP组与缺血再灌注模型组比较明显降低了12、48hr再灌注后缺血皮层的凋亡细胞数，差别有统计学意义(P＜0.05)。 (4)假手术组皮层偶见极少数的p-ERK染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层阳性细胞主要表达在缺血半暗带，主要定位于神经元核内。2hr阳性细胞最多(P＜0.05)。PACAP组与缺血再灌注模型组比较增加了2、12、24、48hr时间点的阳性细胞数，差别有统计学意义(P＜0.05)。
有 (5)假手术组皮层偶见极少数的p-JNK染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层阳性细胞2hr表达在缺血半暗带和中心区，余时间点则主要表达在半暗带。主要定位于神经元核内。有两个高峰分别为再灌注后2hr和48hr(P＜0.05)。PACAP组与缺血再灌注模型组比较降低了2、12、24、48hr时间点的阳性细胞数，差别有统计学意义(P＜0.05)，但仍高于假手术组。 结论 (1)p-ERK、p-JNK在大鼠脑缺血再灌注后的表达可能具有动态和时空依赖性的变化规律。p-ERK早期表达在缺血半暗带。p-JNK表达有早、晚两个高峰，表达于缺血的中心区和半暗带。 (2)PACAP-38可能抑制了缺血半暗带的神经元凋亡。可能是通过平衡c-Jun氨基端激酶(JNK)和细胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化，升高了p-ERK的表达，降低了p-JNK的表达而实现的。 (3)经大鼠尾静脉注入的外源性PACAP-38能明显减轻大脑皮层缺血再灌注损伤，对神经细胞有较明确的保护作用。
为探讨IFN-γ对流产大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary- ovary-axis,HPOA )TNF-α表达的影响,本试验用米非司酮(RU486)建立SD大鼠流产模型,通过腹腔注射不同剂量IFN-γ,采用超敏感免疫组织化学SP法(链霉素抗生物素—过氧化物酶法),观察了孕13天(d13)SD大鼠正常妊娠A组、流产模型B组、不同剂量IFN-γC、D、E组下丘脑、垂体、卵巢、子宫TNF-α的表达变化,探讨低剂量IFN-γ对妊娠是否有保护作用及其作用机制,期望能为在妊娠过程中如何科学应用IFN-γ防止动物流产提供形态学依据。主要实验结果如下: 确认细节 1.观察各组妊娠大鼠子宫颜色及出血情况, A组胎粉红,呈串珠状,宫内未见瘀血; B、C、D、E组均出现不同程度的流产状,B、D、E组胚胎紫黑,较A组变小,或子宫呈竹节状,胚胎消失,宫腔瘀血,阴道出血;C组胚胎深红,部分胚胎消失,阴道少量出血,C组妊娠结果优于B、D、E组。 2. B组TNF-α阳性产物的表达在下丘脑核团、神经垂体、垂体中间部、卵泡、黄体中均较A组显著增高,在垂体前叶较A组显著降低,在卵巢基质以及子宫中的表达与A组无显著差异。表明:同正常妊娠大鼠相比,流产大鼠TNF-α免疫阳性产物表达在HPOA呈现升高趋势,TNF-α属于TH1型细胞因子,介导细胞免疫及迟发性超敏反应,对胚胎具有免疫损伤作用,其表达升高不利于妊娠维持。
3.外源腹腔注射1IU/g IFN-γ后,C组大鼠HPOATNF-α免疫阳性产物的表达变化情况如下:同A组相比:C组TNF-α阳性产物表达在下丘脑视交叉上核、视前大细核、室周核、弓状核显著增强,在腺垂体、黄体、卵巢基质以及子宫中的表达显著降低;同B组相比,C组HPOATNF-α免疫阳性物质表达显著降低。表明:1 IU/gIFN-γ可在一定程度上减弱流产大鼠生殖轴TNF-α的表达,对妊娠维持有一定有益作用。 点击此处 4.外源腹腔注射10 IU/g IFN-γ后,同A组相比:D组TNF-α免疫阳性产物在下丘脑视前内侧核、视上核、视前大细胞核、室周核、室旁核、弓状核显著增高,在视交叉上核显著降低,在其它核团较A组无显著差异,在神经垂体、垂体前叶、卵巢中阳性产物表达均较A组显著降低,在子宫中的表达较A组变化不明显;同B组相比:D组TNF-α免疫阳性产物在弓状核显著增高,在视交叉上核、视前大细胞核、室周核、室旁核、腹内侧核、背内侧核、神经垂体、垂体中间部、卵巢各部阳性物质表达均显著降低,在子宫表达变化不显著;同C组相比:D组下丘脑视前内侧核、视上核、室旁核、弓状核、垂体前叶与中间部均显著增高,在视交叉上核、室周核、神经垂体、卵泡、黄体中均显著降低,子宫中表达变化不明显。表明:10IU/g IFN-γ能减弱流产大鼠下丘脑某些核团、垂体某些部位及卵巢中TNF-α免疫阳性产物表达,但与1IU/g IFN-γ相比,这种作用表现稍弱。 5.