074μM)和5-7q(IC50：0.016μM)。该研究为香豆素[4,3-c]并吡唑类PI3K抑制剂的研发提供了新的思路。
目的探讨罕见疾病肝脏原发神经内分泌癌的临床特征、诊断方法、治疗及转归特点。 方法对1例肝脏原发神经内分泌癌进行研究,并检索近40年来肝脏原发单纯性神经内分泌癌的英文报道,共获取20例病例报道,连同本病例,对这21例病例进行分析。 结果肝脏原发神经内分泌癌病例报道多来自东亚,与肝硬化及病毒性肝炎无关,临床特征多缺乏特异性,免疫组织化学对诊断有重要意义,转移途径以血行转移为主,淋巴转移次之,治疗以手术为主综合治疗,有望获得长期生存。 结论肝脏原发神经内分泌癌极为罕见,临床资料有限,免疫组织化学对诊断有很大帮助,治疗上胃肠胰神经内分泌癌有一定借鉴价值。
目的： 探索EGF诱导NSCLC细胞SPC-A1分泌炎症因子IL-8及其可能的分子通道。 方法： 使用EGF (0.01 ug/ml,0.1μg/ml和1ug/ml)处理人NSCLC细胞24小时,ELISA法测上清中的IL-8蛋白浓度。之后采用EGF(100ng/ml)单独和分别联合EGFR-Tki(厄洛替尼10μM,1μM),PI3K抑制剂GDC-0941和BEZ-235(1μM和100nM),以及ERK1/2的抑制剂PD98059(10μM和1μM)处理SPC-A1细胞系24小时,测上清中的IL-8浓度。最后,采用EGF(100ng/ml)单独和联合新的PI3K抑制剂SHBM1009

(10,6,3, 1μM)作用于SPC-A1细胞,测12小时,24小时,48小时上清中的IL－8浓度。所有实验设立空白对照组。结果： EGF刺激SPC-A1细胞系24小时,上清中的IL-8显著升高,并呈EGF浓度依赖趋势。对照组上清中的IL-8浓度为(43.07±12.26pg/ml),而EGF(10ng,100ng和1ug/ml)刺激组的上清中IL-8水平分别为(103.68±11/36,216.91±8.07和232.21±42.44pg/m1),p值分别为(p<0.01,p<0.001和p<0.01或p<0.05)。而EGFR-Tki(厄洛替尼10μM)能抑制约25%的细胞生长(p<0.01)。BEZ-235可抑制细胞生长约30%-40%(p<0.01)。SHBM1009的抑制作用最强,根据浓度的不同(0.1－1.0和10μM)可抑制约25-35%到60%的细胞生长(p
信号转导在细胞的代谢、分裂、分化、及凋亡过程中起着重要作用,肿瘤发生和转移与细胞的过度激活有关,

查找更多 PI3K/Akt信号通路是细胞内重要的信号转导通路,通过影响下游多种效应分子的活化状态,发挥着抑制细胞凋亡和促进细胞增殖的重要作用。因为PI3K是肿瘤的一个重要靶点,PI3K抑制剂的研究吸引了广泛关注。近年来,多个PI3K抑制剂已经进入临床研究阶段,包括GSK2126458、SF-1126、NVP-BEZ235、XL-147、PX-866、GDC-0941、ZSTK474、GSK2126458 Gefitinib体内 BIBW-2992是不可逆EGFR和HER2双重抑制剂,抑制野生型、耐受和双重耐受的H1666、H3255和NC11875细胞(IC50分别为7、6和93 nM),现处于Ⅱ期临床研究,用于治疗乳腺癌和结直肠癌等。我们通过改变母核来看取代后的活性有没有提高。 阳性对照药GSK2126458的合成比较繁琐,用丙二酸亚异丙酯代替乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯,反应温度降低,缩短了合成步骤,同时,用sonagashira反应和Diels-Alder反应合成了哒嗪环,避免使用昂贵的4-碘哒嗪。 我们合成了一系列BIBW-2992的类似物(TM1~7均未见文献报道),通过高效液相色谱,核磁共振氢谱、质谱等分析方法验证了类似物,进行了体外抗肿瘤活性评价,期望从中筛选出活性优于BIBW-2992的候选药物。 药理试验显示,大部分TM化合物都显示了较强的抗癌活性,进一步的研究还在继续进行。
背景： 在我国,胃癌是最常见恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。手术治疗仍然是根治胃癌的最有效方法,然而仅有少数胃癌患者可通过单纯的手术治疗而获得治愈,大部分患者确诊时也发现远处转移,失去手术机会,多数胃癌患者死于肿瘤的再发或远处转移。内科治疗仍是胃癌主要的治疗方法,目前随着分子生物学的发展及临床用药个体化的重视,优化治疗方案,实现用药个体化成为基础研究和临床试验共同关注的问题,主要体现在生物标志物的检测,预测疗效、判断预后、指导用药；分子靶向药物的研发与临床应用。EGFR、Her-2/neu、均已被证实存在多种肿瘤组织中,与肿瘤的预后有相关性,并且做为分子靶点指导分子靶向药物应用。TopoⅡα是许多化疗药物如鬼臼乙叉甙、替尼泊甙、阿霉素等药物的作用靶点,TopoⅡα含量的高低,可以作为判定各种肿瘤对抗癌药物的敏感性或抗药性的指标。

点击此处 目的： 1.研究EGFR、Her-2/neu、TopoⅡα在胃癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系。 2.探讨EGFR、Her-2/neu、TopoⅡα做为分子靶点指导胃癌靶向治疗的理论意义。 方法： 1.收集河南省人民医院2008年1月-2010年1月期间经手术治疗的108例胃腺癌组织作为实验组,22例胃正常组织作为对照组。 2.应用免疫组织化学方法(SP法)检测108例胃癌组织和22例胃正常组织中EGFR、Her-2/neu、TopoⅡα蛋白表达情况。 3.用统计学软件SPSS17.0分析EGFR、Her-2/neu、TopoⅡα蛋白的表达与患者各临床病理特征之间的关系。 结果： 1.胃癌组织中EGFR、Her-2/neu、TopoⅡα阳性表达率分别为41.67%、31.5%、53.7%,22例正常胃组织阳性表达率分别为和0%、0%、4.5%。阴性与阳性结果有显著统计学差异(P0.05)；与胃癌的部位、细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均呈正相关(P
目的：探讨和研究雷公藤红素(Celastrol)和ABT-737联合应用对人肝癌细胞Bel-7402和HepG2凋亡的影响及其作用机制。 方法：1.MTT法检测ABT-737和雷公藤红素(Celastrol)单用及合用人肝癌细胞Bel-7402和HepG2的细胞存活率,并采用软件CalcuSyn计算CI值；2.DAPI染色观察ABT-737和雷公藤红素(Celastrol)作用后,细胞凋亡小体的产生；3.PI染色结合流式细胞术检测ABT-737和雷公藤红素(Celastrol)作用后细胞凋亡率的变化；4.JC1染色观察ABT-737和雷公藤红素(Celastrol)作用后,线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)的变化；5. Western blotting法检测ABT-737和雷公藤红素(Celastrol)作用后,凋亡相关蛋白,Hsp90客户蛋白,NOXA等关键蛋白的含量变化；6.

05;前肢上抬实验第3天:治疗组为73.3±30.5%:对照组46.7±33.6%,p＜0.05;前肢应用协调实验第1天:治疗组为26.8±17.2%:对照组47.2±17.4%,p＜0.01。

3结论 脑出血后脑组织内存在长时间的铁离子过载现象,尤其是游离铁水平持续维持在高水平状态,可能是导致长时间铁离子介导的过氧化损伤、出现持久性神经功能损害的重要原因。铁离子螯合剂去铁敏能显著降低大鼠脑出血后脑脊液内游离铁水平,但并不能促进脑组织内总铁水平的下降,由此可以推测,去铁敏主要是通过结合及抑制铁离子活化(游离铁形成)而非促进铁离子外排出脑组织,达到减轻游离铁介导的过氧化损伤作用。脑出血后的铁离子过载与血红素加氧酶(HO-1)表达水平上调显著相关,去铁敏治疗在抑制游离铁水平上升的同时也轻微上调了HO-1的表达,表明去铁敏除了作为游离铁螯合剂外,可能还具有其它神经保护作用。 第二部分丝裂原活化蛋白激酶在大鼠脑出血后继发性脑损伤中的作用及其与铁离子过载关系的实验研究 丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,广泛存在于哺乳动物细胞的胞质中,参与调节细胞生长、发育、分裂、死亡以及细胞间的功能同步等一系列生命活动;目前研究得最广泛的是ERK1/2、JNK和p38 而且 MAPK三种MAPK。大量研究发现在各种脑退行性疾病(诸如脑淀粉样变性、Alzemer’s病等)以及缺血性脑卒中、蛛网膜下腔出血的脑损伤反应过程中,均有上述三种MAPKs激活的身影,而采用ERK1/2、JNK或p38 一般 MAPK抑制剂能拮抗缺血再灌注损伤所诱导的细胞凋亡和神经元损伤。但是,有关MAPKs激活与否及其在另一种常见的脑血管意外——脑出血中的作用则鲜有报道。此外我们先前的研究已证实铁离子过载尤其是游离铁的积聚是大鼠脑出血后继发性脑损伤以及神经功能损害的重要因素,然而由铁离子介导的脑出血后继发性脑损伤的细胞内信号途径目前并不清楚,铁离子是否能激活脑出血后MAPKs信号通路表达及其作用效应尚需要得到实验的证实。本研究将对脑出血后MAPKs的激活情况及其与铁离子过载之间的关系进行探讨。 1材料和方法 (1)实验动物及分组:本研究采用随机对照动物实验,采用清洁级Sprague-Dawley雄性成年大鼠36只,体重300g～350g。研究分为两个部分,第一部分探讨成年大鼠脑出血后脑组织MAPKs激活状态及变化情况;第二部分探讨铁离子对MAPKs激活的作用以及铁离子螯合剂去铁敏干预治疗对MAPKs激活的影响。

(2)大鼠脑出血后脑组织MAPKs激活状态及变化的研究:该部分对照组为生理盐水脑内注射组(n=3),实验组为脑出血组(n=9)。大鼠自体血注入脑出血模型的建立办法参见摘要第一部分。在对照组中,除采用等量生理盐水取代自体血以外,其余操作相同。模型建立成功后,分别于术后1、3、7天随机处死实验组大鼠,每时相位点各3只大鼠。应用蛋白印迹分析检测脑组织内磷酸化MAPKs表达水平变化。 (3)铁离子对MAPKs激活的作用以及去铁敏干预作用的研究:该部分对照组为生理盐水脑内注射组(n=6),实验组为脑出血组(n=12)和氯化亚铁(Fecl_2)脑内注射组(1mmol/L,n=6)。大鼠自体血注入脑出血模型的建立办法参见摘要第一部分。在对照组中,除采用等量生理盐水取代自体血以外,其余操作相同;氯化亚铁(Fecl_2)脑内注射组先行将Fecl_2溶解于用生理盐水,制备成1mmol/L溶液,然后将30μl

1mmol/L Fecl_2注入大鼠脑内,注射方法同脑出血模型建立方式。对脑出血组再随机分成两组(n=6),一组给予去铁敏治疗(100mg/kg,腹腔内注射,出血后2小时给药,随后间隔12小时给药一次),另一组给予同等量的生理盐水(给药方式同去铁敏组)。各组模型均于术后1天处死,分别采用蛋白印迹分析及免疫组织化学方法检测磷酸化ERK1/2、JNK和p38 MAPK蛋白表达,每组各3只。 (4)蛋白印迹分析(Western Blot Analysis) 蛋白印迹分析步骤参考第一章摘要,采用的一抗分别有的Mouse anti-phospho-ERK1/2(1:1000),Rabbit anti-phospho-JNK(1:1000)以及Rabbit 并且 anti-phospho-p38MAPK(1:1000)的稀释液,二抗分别选用的1:2000稀释液的过氧化物酶共轭的山羊抗兔抗体或兔抗鼠抗体。抗原抗体复合物通过化学发光系统而显影,应用Kodak X-OMAT胶片摄片。条带的相对密度应用NIH Image(Version 1.61)分析。 (5)免疫组织化学分析(Immunohistochemistry Analysis) 免疫组化分析步骤参考第一章摘要,应用亲和素-生物素复合物法进行检测,采用的一抗分别有的Mouse anti-phospho-ERK1/2(1:200),Rabbit anti-phospho-JNK(1:200)以及Rabbit anti-phospho-p38 MAPK(1:200)的稀释液,二抗分别选用的1:400稀释液的生物素化山羊抗兔抗体或兔抗鼠抗体。阴性对照采用正常兔IgG或缺失一抗的办法。 2结果 (1)实验大鼠生理参数:所有实验大鼠的生理参数在术前及术后1小时立即进行检测。平均动脉压、血PH、PaO_2、PaCO_2、红细胞压积(Hematocrit,Hct)以及血糖均控制在正常范围(平均动脉压:70～100mmHg、血PH:7.4～7.

Endocrine therapy targeting estrogen action is the most important systemic therapy for ER positive breast cancer. However its efficacy is limited by intrinsic and acquired resistance. Mechanisms responsible for endocrine resistance include deregulation of the ER pathway itself,

including loss of ER expression, posttranslational modification of ER, deregulation of ER coactivators; increased receptor 此网站 tyrosine kinase signaling leading to activation of various intracellular pathways involved in signal transduction, proliferation and cell survival, including

growth factor receptor tyrosine kinases human epidermal growth factor receptor-2, epidermal growth factor receptor, PI3K/AKT/mammalian 确认细节 target of rapamycin(m TOR), Mitogen activated kinase(MAPK)/ERK, fibroblast growth factor receptor, insulin-like growth factor-1 receptor; alterations in cell cycle and apoptotic machinery; Epigenetic modificationincluding dysregulation of DNA methylation, histone modification, and nucleosome remodeling; and altered expression of specific micro RNAs. Functional genomics has helped us identify a catalog of genetic and epigenetic alterations that may be exploited as potential therapeutic targets and biomarkers of response. New treatment combinations targeting ER and such oncogenic signaling pathways which block the crosstalk between these pathways have been proven effective in preclinical models. Results of recent clinical studies suggest that subsets of patients benefit from the combination of inhibitor

targeting certain oncogenic signaling pathway with endocrine therapy. Especially, inhibition of the m TOR signaling pathway, a key component implicated in mediating multiple signaling cascades, offers a BGB324核磁共振 promising approach to restore sensitivity to endocrine therapy in breast cancer. We systematically reviewed important publications cited in Pub Med, recent abstracts from ASCO annual meetings and San Antonio Breast Cancer Symposium, and relevant trials registered at Clinical Trials.gov. We present the molecular mechanisms contributing to endocrine resistance, in particular focusing on the biological rationale for the clinical development of novel targeted agents in endocrine resistant breast cancer.

研究所用标本选取郑州大学第一附属医院、郑州大学第二附属医院及郑州大学附属肿瘤医院病理科2005年1月-2012年6月期间103例手术切除标本存档蜡块。其中胆囊癌42例,选自2005年1月-2007年1月期间。采用免疫组织化学SP方法分别检测42列胆囊癌组织、18列胆囊上皮中重度不典型增生组织、13例胆囊织、15例胆囊腺瘤组织及15例慢性胆囊炎组织中CD147和MMP-9的表达。

2.数据应用SPSS17.0软件进行统计学处理。计数资料的比较采用x2检验,CD147和MMP-9之间的相关性用Spearman等级相关性检验,患者术后的预后情况用Kaplan-Meier法进行生存分析,并用log-rank检验。P0.05)。 2.CD147和MMP-9的阳性表达与胆囊癌的分化程度,临床分期,淋巴结转移明显相关(P
目的 1.以壳聚糖为载体,将BMP-2、α-氰基丙烯酸酯正丁酯、β-甘油磷酸钠等复合成生物胶,研究观察其稳定性。制作Wistar大鼠下颌骨骨缺损动物模型,将复合生物胶植入大鼠下颌骨缺损动物模型中观察修复缺损的效果。 2.研究探讨BMP-2/氰基丙烯酸酯复合生物胶对大鼠下颌骨骨缺损的止血、黏结固定、诱导成骨修复颌骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。 方法 1.BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶的制备 2.壳聚糖温敏性水凝胶的制备。 3.大鼠下颌骨矩形骨缺损动物模型的制备。 4.将大鼠随机分为实验组、对照组、空白组。实验组植入BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶,对照组植入壳聚糖温敏性水凝胶,空白组不植入任何材料。创口分层缝合。术中观察BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶止血、黏结固定等。 并且 5.下颌骨标本处理及检测：术后3、6、9周每组各处死6只动物。标本大体观察,各组下颌骨标本拍摄软X线片,观察其缺损骨修复情况。组织学观察：不同时间的标本固定后,用EDTA液脱钙4周,HE染色、石蜡包埋做连续切片,厚度为4μm,光学显微镜观察。

6.统计学分析：测量软x线片,配合使用Image Pro Plus6.0软件计算各组大鼠骨缺损面积(A),进行数据分析。用SPSS17.0软件对各组间数据进行处理,采用单因素方差分析(One 可能 Way ANOVE)进行统计学分析。 结果 1.以壳聚糖为载体,将BMP-2、α-氰基丙烯酸酯正丁酯、甘油磷酸钠等复合成生物胶为半固态状胶冻状、流动性差、具有弹性的凝胶。 2.壳聚糖温敏性水凝胶为淡黄色清亮液体,流动性差可,在37℃水浴,时长约1min可凝固,呈胶冻状。 3.术中实验组植入的BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶表面形成膜状结构覆盖创伤及周围部位,止血及固定效果良好。 4.试验过程中各组大鼠均未出现排异反应,成骨活跃,术后3、6、9周软X线大体观察可见实验组下颌骨骨缺损处密度大于其他两组,其缺损区域缩小。6、9周后实验组下颌骨骨缺损区域小于对照组。统计学分析植入后3、6、9周时,实验组骨缺损面积均低于对照组及空白对照组(P
肝纤维化是各种肝损害因素长期不能解除，致肌成纤维细胞激活，胶原代谢失衡，肝脏组织发生重构的一种病理过程，是各种慢性肝病进展为肝硬化的必经阶段。多种原因引发的慢性肝病严重威胁着我国人民的健康，寻求有效的抗肝纤维化药物是当前的研究热点。如今，许多研究将肝星状细胞作为抗肝纤维化的中心环节，但尚无特异的治疗方法。中医药抗肝纤维化凭借简、便、廉、验的特点为国内外学者广泛关注。李佃贵教授经多年的临床及实验发现，在肝纤维化形成中“浊毒”起着关键作用，运用化浊解毒法组方进行治疗取得了较好的疗效，但是化浊解毒方的作用机制仍不明确。

目的：本实验采用血清药理学方法，在细胞水平上观察了α-SMAmRNA、p38MAPK及JNK蛋白的表达，进而探讨化浊解毒方治疗大鼠肝纤维化的体外作用机制，为化浊解毒方可能存在的治疗靶点及途径提供了分子生物学基础，从以方测证的角度对慢性肝病浊毒证的发病机制提供现代药理学依据。 ABT-199购买 方法：健康成年SD大鼠,制备含药血清，随机分为四组：正常对照组、阳性对照组即复方鳖甲软肝片组、化浊解毒方组即等效剂量和二倍剂量。体外培养原代的肝星状细胞分为：正常对照组（A组）、TGF-β1组（B组）、阳性对照组（C组）、化浊解毒方含药血清等效剂量组(D1组)和二倍剂量组（D2组），除正常对照外各组均加TGF-β1干预，各组加入相应血清，培养24、48、72h后，运用MTT法检测肝星状细胞的增殖；培养48h后，运用RT-PCR法检测肝星状细胞中α-SMA mRNA的表达，Western-blot法检测p-p38、p-JNK蛋白的表达。 结果： 1MTT法检测结果显示：外源性刺激TGF-β1干预的HSC在各组药物血清处理24小时后，与A组比较，B组TGF-β1可明显刺激HSC的增殖，差异有统计学意义（P<0.05）；与B组比较，C、D1、D2组均可明显抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（P<0.05）；与C组比较，D2组可明显抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（P0.05）；D2组较D1组可显著抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（P<0.05）。48小时与72小时后，与A组比较，B组可明显刺激HSC的增殖，差异有统计学意义（均P<0.05）；与B组比较，C、D1、D2组可明显抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（均P<0.05）；与C组相比，D1、D2组可抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（均P<0.05），D2组较D1组可显著抑制HSC的增殖，差异有统计学意义（P<0.05）；与C组相比，D2组可显著抑制α-SMAmRNA的表达，差异有统计学意义（P0.05）；D2组较D1组可明显抑制α-SMA mRNA的表达，差异有统计学意义（P<0.05）；与B组比较，C、D1、D2组p-p38蛋白表达显著降低，差异有统计学意义（P0.05），D2组p-p38蛋白表达降低，差异有统计学意义（P<0.05）；与D1组比较，D2组p-p38蛋白表达降低，差异有统计学意义（P<0.05）；与B组比较，C、D1、D2组p-JNK蛋白的表达显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。与C组比较，D1、D2组p-JNK蛋白的表达量均降低，差异有统计学意义（均P<0.

83:1，中位年龄为49.3岁，30~60岁发病病例占到45.8%，发病年龄呈单高峰分布；淋巴结肿大起病分类的前4位分别为：颈部淋巴结（86例，29.0%），纵膈淋巴结（63例，21.2%），锁骨上淋巴结（41例，13.8%），腹股沟淋巴结（9.1%）；而结外淋巴组织起病分类的前4位分别为：鼻腔（16.5%），除鼻以外的口咽淋巴结环（10.8%），骨髓（6.4%），胃粘膜（5.4%）；局部症状分布为：颈部肿块（95例，32.0%），胸痛和胸闷（19例，6.4%），腹痛（14例，4.7%），皮肤瘙痒（12例，4.0%）；B细胞来源的NHL总的有效率为73.7%，而CR和PR分别为38.4%和35.4%；对于T/NK细胞来源NHL总的有效率为40.5%，而CR和PR分别为14.3%和26.2%；B细胞来源组的NHL的总的有效率和CR明显高于T/NK细胞来源组（χ2=7.977，14.131；P=0.005，0.001）；DLBCL组中高危和高危组为27例（27/64例，42.2%），ENK/T-NT为21例（21/32，65.6%），DLBCL低中危以下组构成比为57.9%；141例完成3周期以上化疗的NHL患者，中位生存期为45.0月，平均生存期为58.5月，3年生存率为52.9%，5年生存率为44.3%；NHL病例通过引入PET/CT影像学检查结果排除CRu病例，与未引入PET/CT评价比较，CR比例从25.0%，提高到37.5%，而PR比例也从12.5%提高到37.5%；IPI预后指标低危组DLBCL病例3年生存率为77.8%，高危组DLBCL病例3年生存率为59.4%，且两者总的生存期比较具有显著差异（χ2＝3.559，P=0.037）；Ann

MI-773化学结构 Abor临床分期分组的早期组DLBCL病例3年生存率为83.6%，中晚期组DLBCL病例3年生存率为64.2%，两者总的生存期比较无显著差异（χ2＝2.869，P=0.09）；老年人DLBCL采用CD20（+）病例组3年生存率为78.4%，CD2（0-）病例组3年生存率为89.2%，两者总的生存期比较无显著差异（χ2＝1.907，P=0.167）；老年人DLBCL采用R-CHOP方案组3年生存率为67.7%，CHOP方案组3年生存率为62.7%，两者总的生存期比较无显著差异（χ2＝1.002，P=0.317）。 结论：1.南华大学附属第一医院收治的NHL病例病理亚型分类的前3位分别是：DLBCL-NOS，ENK/T-NT，MALT；2.本院规范化疗3周期以上B细胞来源的NHL总的有效率为51.5%，T/NK细胞来源NHL总的有效率为33.3%，5年生存率为44.3%；3. PET/CT影像学检查可能有助于提高DLBCL疗效评价的准确性。
背景与目的： 肺癌是目前全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，发病呈逐年上升趋势。作为威胁全世界人类健康的重大疾病，肺癌发病隐匿，早期症状不明显易被忽视，大部分患者在初次诊断时已是晚期，这是目前肺癌疗效不佳的主要原因。作为肿瘤的两大生物学特性，侵袭和转移是导致肿瘤复发以及患者死亡的主要原因之一。而通过对肺癌细胞发生侵袭和迁移的机制的研究，对于控制肺癌的复发和转移有着重要的意义，这也是当今肺癌研究的热点。肿瘤细胞发生侵袭和迁移的过程有多条信号通路参与。其中MAPK信号通路中的一条经典途径——P38MAPK信号通路在肿瘤细胞侵袭和迁移发挥着重要的作用，活化的P38MAPK可以通过调节特定的转录因子的表达和生物活性，实现对肿瘤细胞生物学特性的影响。肿瘤细胞的上皮-间叶转变是指上皮源性肿瘤中的某些细胞在与周围间质相互作用时，丧失其上皮源性，表现为间质细胞特征，也是肿瘤发生侵袭和转移的重要环节，其相关蛋白的表达水平变化与EMT的发生密切相关；EMT发生时，上皮源性肿瘤中的某些细胞在与周围间质相互作用时，丧失其上皮源性，表现为间质细胞特征，是肿瘤发生侵袭和转移的重要原因之一。此外基质金属蛋白酶9因参与基底膜与ECM主要成分IV型胶原的降解，而在肿瘤的侵袭和转移过程中也发挥着重要的作用。研究表明P38MAPK信号通路对肿瘤的复发和转移的影响可分别通过影响EMT相关蛋白的表达或者影响MMP9的活性而实现，但在肺癌中，三者之间的关系尚不明确。为此，本实验将通过抑制P38的活性，观察人肺癌细胞系（H1299、95C）的侵袭和迁移能力的改变，并重点研究其与EMT相关蛋白的表达水平的变化以及MMP9的活性水平和蛋白表达水平的差异，来探讨肺癌中P38参与调节肺癌的侵袭和转移能力的可能的机制。

MLN2238数据表 通常 方法： 通过两种P38抑制剂：SB203580和SB239063抑制P38的活性水平。通过划痕实验和Transwell实验的方法，观察抑制P38的活性水平对两种人肺癌细胞H1299和95C的侵袭和迁移能力的影响；通过明胶酶谱实验来检测抑制P38活性水平对MMP9的活性的影响；并通过Western-blot的方法来观察抑制P38的活性水平对EMT相关蛋白和MMP9蛋白的表达水平的影响。 结果： 实验结果表明，在H1299细胞和95C细胞两种细胞系中使用浓度为10μM的P38抑制剂SB203580和SB239063，可以明显抑制两种细胞的P38的磷酸化水平；划痕实验和无胶的Transwell实验结果表明，抑制P38的活性使得H1299细胞和95C细胞的迁移能力明显下降；铺胶的Transwell实验结果显示，抑制P38的活性对H1299细胞和95C细胞的侵袭能力没有明显的影响；明胶酶谱实验和Western-blot实验的结果表明抑制P38的活性对MMP9的活性以及蛋白的表达水平也没有显著的影响；Western-blot实验的结果表明，抑制P38的活性对使得H1299细胞中EMT相关蛋白β-catenin，和Vimentin的表达水平明显降低，snail蛋白的表达水平无明显变化；95C细胞中EMT相关蛋白β-catenin的表达水平明显降低，而Vimentin和snail蛋白的表达水平没有发生明显变化。 结论： 1.两种P38抑制剂SB203580和SB239063通过抑制P38的磷酸化水平抑制了P38的蛋白的活性；2.抑制P38的活性可以使得人肺癌细胞H1299和95C的迁移能力下降，而对侵袭能力无明显影响；3.